水牛卵泡液差异蛋白质双向电泳方法的建立及质谱分析-畜牧兽医学报.PDF

畜牧兽医学报 ， （）： ２０１３４４８ １２４４１２５０ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 ： ／ ｄｏｉ１０．１１８４３ ．ｉｓｓｎ．０３６６６９６４．２０１３．０８．０１０ ｊ 水牛卵泡液差异蛋白质双向电泳方法 的建立及质谱分析  黄愉淋，黄德伦，官俊良，潘秋庄，付 强，黄凤玲，张 明 ，卢克焕 　 　 （广西大学，动物繁殖研究所，亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁 ５３０００４） 摘 要：旨在研究沼泽型水牛成熟前后卵泡内差异表达蛋白质的变化规律。采用双向凝胶电泳技术分离成熟卵泡 　 液和未成熟卵泡液总蛋白质，建立和优化了卵泡液的双向电泳体系，并使用质谱鉴定差异表达蛋白点。结果显示， 丙酮沉淀法处理得到的总蛋白质样品后，在 （ ）胶条且上样量 时得到分辨率较好的双向电泳 ２４ｃｍ Ｈ４ ７ ３５０ ｐ ～ μｇ 图谱。软件分析得到 个差异蛋白点，以成熟卵泡液作为对照，个蛋白点表达上调，个蛋白点表达下调，个蛋 １１ ５ ３ １ 白点缺失，个蛋白点在未成熟卵泡液中特异性表达。质谱成功鉴定出 个蛋白质：过氧化物酶 、醛糖还原酶、牛 ２ ４ ２ 纤维蛋白原的晶体结构、转甲状腺素蛋白。该研究建立了良好的卵泡液双向电泳体系，分析并鉴定一批水牛卵泡 液差异蛋白质，对于研究水牛卵母细胞的发育微环境和成熟机制提供了新的研究线索。 关键词：水牛；卵泡液；蛋白质组；双向电泳；质谱鉴定 中图分类号： ＋ 文献标志码： 文章编号： （ ） Ｓ８２３．８３．２ Ａ ０３６６６９６４２０１３０８１２４４０７ 　　　　 　　　　 犈狊狋犪犫犾犻狊犺犿犲狀狋狅犳犜狑狅犇犻犿犲狀狊犻狅狀犪犾犈犾犲犮狋狉狅犺狅狉犲狊犻狊犕犲狋犺狅犱犪狀犱犕犪狊狊犛犲犮狋狉狌犿犲狋狉 狆 狆 狔 犃狀犪犾狊犻狊狅犳狋犺犲犇犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪犾犘狉狅狋犲犻狀狊狅犳犅狌犳犳犪犾狅犉狅犾犾犻犮狌犾犪狉犉犾狌犻犱 狔 ， ， ， ， ， ＨＵＡＮＧＹｕｌｉｎ ＨＵＡＮＧＤｅｌｕｎ ＧＵＡＮＪｕｎｌｉａｎ ＰＡＮＱｉｕｚｈｕａｎ ＦＵＱｉａｎ ｇ ｇ ｇ  ， ， ＨＵＡＮＧＦｅｎｌｉｎ ＺＨＡＮＧＭｉｎ ＬＵＫｅｈｕａｎ ｇ ｇ ｇ