花生叶片蛋白质双向电泳的方法与优化-华北农学报.PDF

华北农学报 ·2 0 10 , 2 5 ( 2 ) : 13 6 13 9 花生叶片蛋白质双向电泳的方法与优化 1 2 1 1, 2 邵媛媛 ,柳展基 ,王龙龙 ,毕玉平 ( 1. 山东师范大学 生命科学学院 , 山东 济南 　250014; 2. 山东省农业科学院 高新技术中心 , 山东 济南 　250 100) 　　摘要 : 以花生品种鲁花 14 为试验材料 ,提取叶片可溶性蛋白进行双向电泳分析 。在三氯乙酸 /丙酮沉淀法的基 础上 ,对样品抽提 、样品溶解 、胶条 pH 范围选择 、蛋白上样量 、SD S聚丙烯酰胺凝胶电泳等关键步骤进行改进 ,获得了 蛋白点较多、重复性好的双向电泳图谱 ,为开展花生叶片蛋白质组研究奠定了基础 。 关键词 :花生 ;可溶性蛋白;双向电泳 ; SD S聚丙烯酰胺凝胶电泳 中图分类号 : TQ93　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 1000 - 7091 (20 10) 02 - 0 136 - 04 The M ethod and Im provem en t of Two D im en siona l Electrophoresis for L eaf Prote in of Peanuts( A rach is hypogaea ) 1 2 1 1, 2 SHAO Yuanyuan , L IU Zhanj i ,WAN G Longlong ,B I Yup ing ( 1. College of L ife Science, Shandong Norm al Un iversity, J inan　250014, Ch ina; 2. H iTech Research Cen tre, Shandong A cademy of A gricu ltu re Science s, J inan　250100, Ch ina) ( ) Abstract: The two dim en sional electrophore sis 2DE technology wa s u sed to demon strate the p rotein p rofile of leave s in p eanut cu ltivar Luhua14. H igh quality and rep eatab le m ap swere obtained on according to TCA / acetone p re cip itation m ethod w ith som e imp rovem ent, such as samp le extraction and dissolution, the pH rang of the immob ilized gradient strip s( IPG) , the p rotein quantity of samp leloading and SD SPA GE. Th is m ethod and imp rovem en t w ill be help fu l to p roteom ic research in p eanu t. Key words: Peanuts; The solub le p rotein; TwoD gel electrophore sis; SD SPA GE (