人甲状腺肿瘤组织中c-Met mRNA和蛋白的表达.pdfVIP

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· 106· 堂堂 (匿芏 ) 08年1月 第43卷 第1期 水中提取2 h,趁热过滤,滤饼用热水洗涤(30 mL× 热量,使反应系统自行升温,达到充分显色,故可免 3),洗液并人滤液,合并滤液,减压浓缩后定容备 去水浴加热步骤,在室温下直接显色。实验证明该 用。按 1.2.1中方法测定吸光度,依回归方程计算 法可行。另外,作者在预实验中对多糖的5种提取 待测样品溶液中葡萄糖的浓度,按下式计算样品中 方法:醇提取法、水浸提取法 、碱浸提取法、酸浸 总糖的含量:总糖含量 =(C×D×f/W)×100%。 提取法及超声提取法 进行了比较,结果显示,碱 经5次平行实验测得雀儿舌头中总糖的平均含量为 液所提取的多糖含量明显高于其余几种,推测与该 1.465% 。 植物体内存在的大量酸性物质有关,所提取的物质 精密称取雀儿舌头样品粉末6.0 g,置于烧瓶 应不仅仅是多糖,说明该数据不可信。其余4种方 中,不经乙醇脱脂,直接于90℃水中提取2 h,趁热 法相比,以热水提取多糖的收率最高,说明在提取雀 过滤,滤饼用热水洗涤(30 mL×3),洗液并人滤液, 儿舌头中的多糖时,应该用热水浸提法。 合并滤液,减压浓缩至10 mL,加入无水乙醇使乙醇 参考文献 含量达80%,静置过夜,多糖沉淀,过滤除去沉淀, 将乙醇除去后,加水溶解至 100 mL,摇匀。精密量 1]冉先德.中华药海[M].哈尔滨:哈尔滨出版社,1993: 取1.0 mL,按1.2.1中方法测定吸光度,依回归方 1 670 程计算待测样品溶液中葡萄糖的浓度,按下式计算 [2]谢宗万,余万芩.全国中药名鉴[M].北京:人民卫生出 版社,1996:382 样品中还原糖的含量:还原糖含量=(C×D×_,/W)× [3]李兆兰,郑涛.灵芝菌丝体和发酵液有效成分及其含量 100%。经5次平行实验测得雀儿舌头中还原糖含量 分析[J].中草药,1994,25(1):l7 为0.728%,计算得出多糖含量为0.737%。 4]刘敏,高岚.紫外分光光度法测定灵芝孢子粉胶囊中灵 2 讨论 芝多糖含量[J].现代中药研究与实践,2005,19(4):34 [5]林颖,吴毓敏,吴雯,等.天然产物中糖含量测定方法正 苯酚.硫酸法测定多糖含量为一经典方法 ,但 确性的研究[J].天然产物研究与开发,1996,8(3):5 文献报道的多糖测定实际为总糖的测定,而且苯酚一 [6]高丽娟.黑木耳中多糖的测定[J].中国医药工业杂 硫酸法需要使用沸腾的水浴反应 10~15 min后才 志,2003,34(3):144 [7]林鹏程,梁永欣,康吉森.西藏岩白菜中多糖的含量测 能进行测定,步骤繁琐、速度慢。对此作者进行了一 定 J].青海科技,2005(4):30 些改进,即沉淀并分离多糖再以同法测定溶液中的 (2007—05—14收稿 责任编辑徐春燕) 还原糖;由于硫酸和水发生水合作用释放出大量的 人甲状腺肿瘤组织中c—Met mRNA和蛋白的表达 尚立芝1,2 李德祥 王建人

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