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Cr(VI)对L.02肝细胞钙稳态的影响
摘要
chromium,Cr
目的:在体外试验系统,探讨六价铬(hexavalent
(VI))对L一02肝细胞钙稳态的影响及其可能机制。
方法:用L.02肝细胞为受试细胞,通过台盼蓝染色试验检测
Cr(VI)对L.02肝细胞存活率的影响,选取细胞存活率在75.0%以上的
为后续试验染毒浓度,细胞染毒处理时间分别为:0、5、20、40、60、
性(LDH)、质膜与线粒体ATP酶分别用化学比色法检测;细胞膜流
动性(荧光偏振度)与细胞内钙离子浓度([Ca2+】:)用荧光比色法检
测。
结果:Cr(VI)对L.02肝细胞存活率的影响:L.02肝细胞生存率
的相关系数v=.0.993(P0.01),两者呈负相关。
度升高出现的最早时间为染毒40分钟,染毒120分钟时比对照组升
高86.2%。在8009mol/L
早时间为染毒20分钟,染毒60分钟后则开始降低,120分钟时与对
照组相比无显著差别。
细胞脂质过氧化损伤:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间的
延长,细胞内MDA和GSH含量分别呈升高和降低趋势。其中,
现时间均为5分钟,在染毒120分钟时MDA含量较对照组增加242.3
%,GSH含量减少65.9%。
膜通透性和流动性改变:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间
的延长,LDH漏出和细胞膜荧光偏振度呈升高趋势,其中8001Jmol/L
处理组LDH漏出与荧光偏振度最早出现明显改变,效应最早出现的
时间分别为20、40分钟,在染毒120分钟时LDH漏出与荧光偏振度
分别较对照组增加90.2%、18.9%。
膜ATP酶活性变化:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间的
呈降低趋势。其中,800I.tmol/L处理组3种ATP酶活性最早出现改变,
效应最早出现时间为20分钟,染毒120分钟时3种ATP酶活性分别
较对照组降低64.3%、62.2%、40.0%。
调。Cr(VI)司-通过损伤细胞膜(增加了细胞外钙离子的内流)与抑制
ATP酶活性(减少细胞内钙离子向细胞外泵出及向线粒体转运)影响
L.02肝细胞内钙离子浓度,而Cr(VI)诱导的氧化损伤则通过引起损伤
细胞膜与抑制ATP酶活性,在L.02细胞内钙稳态失调中发挥作用。
关键词:Cr(VI);L.02肝细胞;钙稳态;钙离子;膜通透性
on
E虢ctsofHexavalentChromiumCalciumHomeostasis
inL·02
Hepatocytes
Abstract
theeffectsofhexavalent
Objective:Toexplore
on homeostasisinL一02 anditsmechanisms/nvitro
calcium hepatocytes
test.
effectof cellsurvivalratewasmeasured
Methods:The
Cr(VI)on by
blueexclusioninculturedL一02 in
hepatocytes.L一02
trypan hepatocytes
with50
alltestswereincubated pmol/L,200pmol/L,800lamol/L
concentrationsof
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