《食品中富马酸二甲酯的测定高效液相色谱法》..doc

DBS 53 云南省食品安全地方标准 DBS 53/ 015—2013 食品中富马酸二甲酯的测定 高效液相色谱法 2013 - 10 - 20发布 2014 - 04 - 20实施 云南省卫生厅发布 前言 本标准为首次发布。 食品中富马酸二甲酯的测定 高效液相色谱法 范围 本标准适用于食品中富马酸二甲酯（霉克星）含量的测定。 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 原理 富马酸二甲酯（DMF）为白色片状或粉末状结晶，对热不稳定，易升华。微溶于水，易溶于乙酸乙酯、氯仿和醇类。样品用甲醇萃取、沉淀、净化后，注入高效液相色谱柱，以保留时间定性、峰面积定量。 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 甲醇。 甲醇：色谱纯。 乙酸铵。 四丁基溴化铵。 富马酸二甲酯标准储备液：准确称取富马酸二甲酯1.000g（以100%纯度计），用甲醇（4.1）溶解并定容于100 ml容量瓶中，配成浓度为10mg/ ml的标准储备液。 富马酸二甲酯标准工作液：用甲醇（4.1）把标准储备液按比例逐级稀释后配成浓度为0μg/ ml、5μg/ ml、10μg/ ml、15μg/ ml、20μg/ ml、25μg/ ml的标准工作液 乙酸铵溶液（0.02mol/L，含0.008 mol/L四丁基溴化铵）：称取1.54 g乙酸铵（4.3）、2.60 g四丁基溴化铵（4.4）以适量水溶解后，加水至1000mL。过0.45μm滤膜。 微孔滤膜：0.45μm有机系滤膜。 仪器和设备 LC-10A液相色谱仪（带紫外检测器或二极管阵列检测器）。 天平（感量0.01g和0.0001g）。 超声波振荡器。 分析步骤 试样处理 液体样品：准确称取混合均匀的样品10.0g于50mL具塞比色管中，加入10mL甲醇（4.1），用超声波（5.3）萃取20分钟，冷却后用甲醇（4.1）定容于25ml，混匀、沉淀，上清液过0.45μm有机系滤膜过滤（4.8）。 固体、半固体样品：准确称取制备均匀的样品5. 0g于50mL具塞比色管中，加入10mL甲醇（4.1），用超声波（5.3）萃取20分钟后冷却至室温后再超声20分钟，冷却后用甲醇（4.1）定容于25ml，混匀、沉淀，上清液过0.45μm有机系滤膜过滤（4.8）。 测定 HPLC参考条件 色谱柱：ODS-C18，150mm×4.6mm,5μm,或具有同性能的色谱柱； 流动相：乙酸铵（4.7）-甲醇（4.2）＝ 70：30； 流速：1mL/min； 检测波长： 230nm。 富马酸二甲酯标准曲线绘制 配制浓度为0、5、10、15、20、25μg/ ml的标准工作液，经0.45μm滤膜（4.8）后分别将10μL标准工作液注入液相色谱仪，测定相应的峰面积并绘制浓度-峰面积标准曲线。 试样的测定 将制备好的试样溶液（6.1）10μL 注入液相色谱仪，测定相应的峰面积，从标准曲线上查得试样溶液中富马酸二甲酯的浓度。 分析结果的表述 试样中的富马酸二甲酯含量按下面公式进行计算： (1) 式中： X——试样中富马酸二甲酯的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； C——从标准曲线上查得试样溶液中富马酸二甲酯的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V——试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量，单位为克（g）。 以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留到小数点后一位。 当取样量为5g、定容至25 mL时，本标准定量限为0.5mg/kg。 精密度 在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% 。 （资料性附录）富马酸二甲酯的标准品色谱图 富马酸二甲酯的标准品色谱图 _________________________________ DB53/ 015—2013 I