细菌霉菌及酵母菌计数方法验证1份ok.doc

有限公司GMP管理文件 题 目 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证 制 定 审 核 批 准 制定日期 审核日期 批准日期 颁发部门 GMP办 颁发数量 生效日期 分发单位 企管部、质保部、生产部、工程部 文件编码 共 14 页 第 1 页 一、目 的：当建立微生物限度检查法时，应进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。 二、适用范围：细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。 三、责 任 者：质量标准分析方法验证小组。 四、正 文： 1、验证申请 2、验证立项申请表 3、验证方案 4、验证方案的批复 5、验证报告 6、验证报告的审批 7、验证证书 文件编码 第 2 页 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证申请 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证申请。我公司细菌、霉菌及酵母菌计数方法严格按照《中华人民共和国兽药典》2005年版质量标准分析方法验证指导原则进行，今拟对细菌、霉菌及酵母菌计数方法进行验证。请予以批准！ 附：细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证小组成员名单 组长： 成员： 申报单位： 质量标准分析方法验证小组 申报日期： 年 月 日  文件编码 第 3 页 验证申请批复 立项部门 申请日期 立项题目 要求完成日期 验证原因 类 别 验证要求及目的 立项部门负责人签名： 主管部门意见 签名： 年 月 日 验证部门意见 签名： 年 月 日 总经理意见 签名： 年 月 日 指定编制验证方案的部门： 编制验证方案要求： 验证完成要求及日期： 总经理签名： 年 月 日 备注： 文件编码 第 4 页 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证方案 一、概述： 1、名称：微生物限度检查法细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证报告。 2、目的：当建立微生物限度检查法时，应进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。 3、验证判断标准：《中华人民共和国兽药典》2005年版附录XIJ 4、验证人员： 质保部：负责对验证结果进行评价。 化验室：负责验证情况的检测和监督。 总经理：负责对验证结果进行评价。 5、验证日期： 二、验证 1、验证依据：《中华人民共和国兽药典》2005年版附录XIJ微生物限度检查法。 按供试液的制备和细菌霉菌及酵母菌计数所规定的薄膜过滤法及其有关要求进行。 2、内容： （1）菌液所用的菌株传代次数为3 代，接种大肠埃希菌，金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，培养24小时， 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，培养48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数为60cfu的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养7天，加入5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后吸出孢子悬液（用管口带有薄的无菌沙布能过滤菌丝的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数60cfu的孢子悬液。 （2）验证方法 验证试验进行了3次独立的平行试验。 A、试验组 供试液（Ⅰ）纯化水1ml（Ⅱ）药品名称（1：100）10g，取供试液1ml过滤冲洗，在最后一次冲洗液中加入60cfu试验菌。 文件编码 第 5 页 B、菌液组 测定所加试验菌数。 C、供试品对照组 取相当于供试品1g（1ml），按菌落数据计数方法测定供试品本底菌数。 D、稀释剂对照组 用相应稀释液0.9%无菌氯化钠，加入试验菌，使最终菌浓度为每1ml供试液60cfu，按薄膜过滤法制备计菌落数。 （Ⅰ）纯化水 项目 菌株 试验组A 菌液组B 供试品对照组C 稀释剂对照组D D组菌回收率% D/B C组菌回收率% (A-C)/B 大肠 埃希菌 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1