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河北省唐山市开滦第二中学高中生物11DNA重组技术的基本工具导学案新人教版选修3
河北省唐山市开滦第二中学高中生物 1.1 DNA重组技术的基本工具导学案 新人教版选修3
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【学习目标】
1.说出基因工程的含义并指出基因工程的主要内容。
2.说出限制性核酸内切酶的含义及作用特点。
3.说出DNA连接酶的作用。
4.简述质粒的含义、特性及其在基因工程中的作用。
【重点难点】
重点: 1.限制性核酸内切酶的含义及作用特点。
2.说出DNA连接酶的作用
3.运载体的种类及需具备的条件
难点:1.限制性核酸内切酶与DNA连接酶的作用与区别
2. 运载体的种类及需具备的条件
【自主学习】
一、基因工程诞生的理论基础(回忆有关遗传知识)
1、 是生物的主要遗传物质。
2、DNA的基本组成单位都是 。
3、双链DNA分子的空间结构都是 。
4、遗传信息的传递都遵循
5、生物界共用一套 。
二、基因工程的基本工具
(一)限制性核酸内切酶——分子手术刀
1、来源:主要从 中分离。
2、功能:能够识别双链DNA分子的某种 序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的
(氢键或磷酸二酯键)断开。
3、切割后的末端有 和 。
(选一选)下列关于限制酶的说法正确的是( )
A、限制酶广泛存在于各种生物中,但微生物中很少
B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
C、不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
D、限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键
(二)DNA连接酶——分子缝合针
1、功能:DNA连接酶能够将 的(即具有黏性末端)两个片段连接起来,拼接的位置是由限制酶断开的 。
2、种类:从 中分离得到的 从T4噬菌体中分离得到的 。
3、两种DNA连接酶的区别:
4、DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
DNA连接酶 DNA聚合酶 作用实质 是否需模板 作用对象 在两个
之间形成磷酸二酯键 将 加到已存在的核酸片段上,形成磷酸二酯键 (三)运载体——分子运输车
(1)现在通常使用的载体是 ,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状 。
(2)质粒具有作为载体必须具备的条件:
①在受体细胞中可以 复制,也可整合细菌拟核DNA中,随着拟核DNA的复制而复制。
②具有一个至多个 切点,以便与 ;
③具有某些 ,供重组DNA的 ,如 抗性基因。
(3)其他载体还有 和 等。
(4)真正被用做载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过 。
【问题生成】
【师生互动,问题探讨】
1.几种相关酶的比较
名称 作用 参与生理过程及应用 DNA连接酶 连接两个DNA片段 限制性内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 RNA聚合酶 在核苷酸链上添加单个核苷酸 解旋酶 使碱基间氢键断裂形成单个脱氧核苷酸链 DNA复制 逆转录酶 以RNA为模板合成DNA 逆转录、基因工程
2.如何利用标记基因鉴定和选择重组DNA?
3.为什么基因的载体需要有一个至多个限制酶的切点?
【课后小结与反思】
【自我检测】
1.质粒是基因工程最常用的运载体,它的主要特点是( )
①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小
④蛋白质 ⑤环状RNA分子 ⑥环状DNA
A.①③⑤ B.②④⑥ C.①③⑥ D.②③⑥
2.下列关于基因操作的工具叙述中,正确的是( )
A.限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列
B.基因工程所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体
C.一
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