三维或单层培养结肠癌HTΟ29细胞药物敏感性及生物学特性的变化.PDFVIP

第 27卷第 17期 第 　三 　军 　医 　大 　学 　学 　报 Vol. 27 , No. 17 1760 2005年 9月 　　ACTA 　ACAD EM IA E　M ED IC INA E　M IL ITAR IS　TER TIA E　　 Sep. 2005 论著 文章编号 :(2005) 三维或单层培养结肠癌 HT 29 细胞药物敏感性及生物学特性的变化 ( ) 李建军 ,蒋 　勇 ,胡绍毅 ,何建明 ,边志衡 ,梁后杰 　　 第三军医大学西南医院肿瘤科 ,重庆 400038 　　提 　要 : 目的　观察结肠癌 H T29细胞在三维或单层培养条件下细胞形态学 、细胞周期 、细胞凋亡及对化疗药物 5 Fu敏感性的变化 。方法 　分别采用 liqu id overlay技术或常规贴壁法对 H T29细胞进行三维或单层培养 ,通过显微镜观察 细胞形态学变化 ,流式细胞仪测定不同培养方式对细胞周期和凋亡率的影响 ,并采用 radial outgrow th 测定法或 M TT法分 别测定三维或单层培养细胞对 5 Fu 的敏感性 。结果 　三维培养 H T29细胞悬浮生长 ,形成致密的多细胞球结构 , 中心出 现坏死区 ,细胞间有较多的微绒毛 、紧密连接 、桥粒等结构 ,而单层培养 H T29 细胞呈单层贴壁生长 ,未见紧密连接 、桥粒 ( ) ( ) 等连接结构 ;与单层培养细胞相比 ,三维培养 H T29细胞 G 期比例明显升高 [ 64 95 ±059 %对 3677 ±051 % , P 1 ( ) ( ) 00 1 ] 、细胞 自发性凋亡率降低 [ 099 ±012 %对 479 ±049 % , P 00 1 ] 、对 5 Fu产生明显耐药 。结论 　三维培养 H T29细胞在细胞形态学 、细胞周期 、细胞凋亡等方面与单层培养细胞存在明显差异 ,可能是导致结肠癌多细胞耐药的重 要原因。 　　关键词 : 多细胞耐药 ;细胞周期 ;凋亡 ;三维细胞培养 ;结肠癌 　　中图法分类号 : R7302; R7353 + 5 　　 文献标识码 : A HT 29 cells cultured a s threed im en siona l m odel or m onolayer L I J ian jun , J IAN G Yong, HU Shao yi, H E J ian m ing, B IAN Zh iheng, L IAN G Hou j ie (D ep artm ent of Oncology, Sou th west Ho sp ital, Th ird M il