高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量.docVIP

高效液相法对比紫外分光光度法测定阿莫西林胶囊含量 　　摘要：目的 HPLC及UV测定阿莫西林胶囊的含量对比。方法 高效液相色谱法选择色谱柱为Agilent C18（4.6×250 mm，5 μm）， 流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（pH=5）-乙 腈 （97.5：2.5），流速为1.0 ml/min，检测波长为254 nm，紫外法选择254 nm波长测定含量。结果 HPLC法中阿莫西林在2.56 ～56.15ug/ml范围内线性关系良好，回归方程：Y=65257X-3244531（r=0.9996），加样回收率平均值为100.68%，RSD 1.7%。结论 HPLC法对比紫外分光光度法测定阿莫西林含量更为准确，重复性高，专属性强 　　关键词：阿莫西林；高效液相色谱法；紫外分光光度法 　　阿莫西林因其耐酸、口服吸收快、生物利用度高等特点，使其在临床上深受医生和患者的厚爱[1]。2015版药典中推荐使用高效液相色谱法来分析本品[2]，但相对来说紫外分光光度法仪器设备要求简单，检测时间快捷，该法是否可以作为本品基层药物监测的备选方法值得考察。本文由此出发，对比分析高效液相及紫外分光光度法测定阿莫西林含量。 　　1临床资料 　　岛津 LC-2010CHT 型高效液相色谱仪；岛津UV-2450型紫外分光光度计；乙腈由霍尼韦尔贸易（上海）有限公司提供，为色谱醇；氢氧化钾、磷酸二氢钾、N-溴代丁二酰亚胺均为色谱纯；阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，批号：130409-201011，纯度85.80%）；阿莫西林胶囊（武汉健民集团随州药业有限公司）。 　　2实验方法 　　2.1高效液相色谱法 　　2.1.1色谱条件[2] 色谱柱选择Agilent C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液 （用 2 mol/LKOH调节pH值5.0）-乙 腈 （97.5：2.5），检测波长：254 nm， 进样量10 μl，1.0 ml/min流速，柱温为室温（25℃）。 　　2.1.2溶液的制备 　　2.1.2.1供试品溶液的制备 精密称取10颗阿莫西林?z囊，混合均匀，采用十万分位天平精密称定0.100g供试品，转移入50 ml容量瓶中，加入20 ml流动相后，震荡至澄清，加流动相至对应刻度后，用0.2 μm有机滤膜过滤，取续滤液待用。 　　2.1.2.2对照品溶液制备 用十万分位天平精密称取11.23mg阿莫西林对照品，转移入100 ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀至澄清即得。 　　2.1.3高效液相色谱法 　　2.1.3.1精密度试验 于“2.1.1” 项色谱条件下，取对照品溶液重复进样（n=6），进样量均为10 μl，测定每次峰面积，结合所得数据计算RSD，结果RSD=1.6%2.0%，达到药典规定，提示本法精密度良好。 　　2.1.3.2重复性试验 取同批次供试品6份，根据“2.1.2.1”项下供试品制备方法制备供试品溶液，采用“2.1.1” 项色谱条件，每份样品进样10 μl，采集每次峰面积，结合所得数据计算RSD，结果RSD=1.4%2.0%，达到药典规定，提示本法重复性良好。 　　2.1.3.3稳定性试验 于0h、4h、8h、12h、24h取“2.1.2.1”项供试品溶液，采用“2.1.1”项色谱条件，测定不同时间点的色谱峰面积，结合所得峰面积计算不同时间供试品浓度变化，结果RSD=1.3%2.0%，达到药典规定，提示供试品在24 h内较为稳定。 　　2.1.3.4回收率考察 采用5 ml移液管精密量取5 ml “2.1.2.1”项供试液（n=3），保存至3个锥形瓶内，依次加阿莫西林对照品2.42mg、5.87和10.29mg，混合均匀后取续滤液，进样10 μl，测定对应样品的峰面积，结合所得浓度计算回收率，所得回收率分别为：100.93%、100.62%和100.48%，平均100.68%，RSD 1.7%2.0%，达到药典规定。 　　2.1.4 线性关系考察 采用对应刻度移液管分别量取“2.1.2.2”下对照品溶液0.20 ml、0.50 ml、0.80 ml、1 ml、2 ml、5 ml于10 ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，用0.2 um有机滤膜过滤，取对应续滤液即为系列标准溶液。采用“2.1.1” 项色谱条件，进样10 ul，测定系列标准溶液色谱峰面积，并以峰面积为横坐标和浓度纵坐标绘制标准曲线，得到方程为：Y =65257X-3244531（r=0.9996），提示，阿莫西林浓度在2.56～56.15ug/ml范围内与峰面积存在良好的线性关系。 　　2.2紫外分光光度法 参考文献[3]，平行精密称取3份阿莫西林胶囊，每