黄芪当归对药不同剂量与配比对IPF小鼠生存状况及基因表达水平影响-李丽君,范盎然,葛东宇.pdfVIP

第 1 7 卷 第 7 期 辽宁中医药大学学报 Vol. 17 No. 7 2015 年 7 月 JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM Jul .，2015 DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2015.07.015 黄芪当归对药不同剂量与配比对IPF小鼠生存状况及 TGF-β、IL-6、Foxp3、RORγt基因表达水平影响 李丽君，范盎然，葛东宇，吴谦，王淑艳，李根茂，陈萌，李丽娜 （北京中医药大学基础医学院，北京 100029 ） 摘 要： 目的：观察不同剂量与配伍比例的黄芪、当归对药对IPF小鼠生存状况及Th17/Treg细胞分化关键基 因TGF-β、IL-6、foxp3、RORγt表达水平的影响，并探讨其相互关系及保护机制。方法：SPF级ICR雄性小鼠 80只，体重18~22 g，随机分为正常对照组、模型组、以及6个不同配比与剂量的黄芪当归组成的中药治疗组（①大 剂量黄芪当归5∶1组；②大剂量黄芪当归1∶1组；③大剂量黄芪当归1∶5组；④小剂量黄芪当归5∶1组；⑤小剂 量黄芪当归1∶1组；⑥小剂量黄芪当归1∶5组），每组10只，除正常对照组外，其余各组采用气管内注射博莱霉素 （5 mg/kg）复制小鼠肺纤维化模型。造模第2天起，正常对照组和模型组用生理盐水灌胃，6个中药治疗组给予不同 配比与剂量的黄芪当归水煎液灌胃治疗，于第28天处死小鼠，采用Real time-RT-PCR法检测Th17/Treg细胞分化 关键基因TGF-β、IL-6、foxp3、RORγt表达水平，HE染色及武兆发简化Mallory氏胶原染色，观察肺组织形态变 化。结果：HE染色及胶原染色显示，模型组小鼠可见支气管周围及肺泡间隔有大量炎症细胞浸润，纤维化程度明显。 中药第1、6组肺泡炎明显好转，肺泡内未见明显的炎性细胞，肺泡隔、细小支气管周围的纤维化病灶较模型组有明 显改善。中药第2、3、4、5组肺泡炎较对照组重，但与模型组比较有很大程度的减轻，肺泡隔纤维增生灶较模型组有 所改善，但不如第1、6组明显。第28天时，模型组小鼠体重明显低于对照组，与模型组比较，各组小鼠体重均呈上升 的趋势，中药第1组小鼠体重上升趋势较大（P 0.05）。第28天死亡率，中药治疗组小鼠的死亡率较模型组降低，其 中第1组死亡率与模型组的差异有统计学意义（P 0.05）。模型组TGF-β、RORγt、IL-6 mRNA表达水平均高于 对照组，Foxp3 mRNA表达水平均低于对照组（P 0.05）。结论：从小鼠的生存率与体重变化及病理形态观察来看， 大剂量黄芪当归5∶1组能明显改善小鼠的生存质量，其作用机制可能与抑制Th17分化关键基因TGF-β、IL-6、 RORγtmRNA的表达水平，促进Treg分化关键基因Foxp3 mRNA的表达水平有关。 关键词：肺纤维化；黄芪；当归；调节性T细胞；辅助性T细胞17 ( ) 中图分类号：R563.9 文献标志码：A 文章编号：1673-842X 2015 07- 0042- 05 Astragalus Angelica Ratio of Drug Doses and on IPF Mice Survival Condition and TGF- beta，IL-6，Foxp3，ROR Gamma t the Influence of the Level of Gene E