HPLC测定萘敏己锌滴眼液盐酸萘甲唑啉及马来酸氯苯那敏含量.docVIP

HPLC测定萘敏己锌滴眼液盐酸萘甲唑啉及马来酸氯苯那敏含量摘要：目的建立HPLC测定萘敏己锌滴眼液中盐酸萘甲唑啉和马来酸氯苯那敏含量和有关物质。方法使用C,8柱，庚烷磺酸钠溶液，甲醇(60：40)为流动相，检测波长230nm。结果盐酸萘甲唑啉浓度在5，80-58.00μg／mL之间与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9，π=5)，最低检出限0.20 ng，平均回收率99.79％，RSD=0.23％；马来酸氯苯那敏浓度在10.60～212.00μg／mL之间与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9，n=5)，最低检出限0.72ng，平均回收率99.95％，RSD=0.65％。结论此法准确度、精密度好，可有效测定萘敏己锌滴眼液中盐酸萘甲唑啉和马来酸氯苯那敏的含量及有关物质。 关键词：萘敏己锌滴眼液；盐酸萘甲唑啉：马来酸氯苯那敏：含量：高效液相色谱法 中图分类号：R988.1　文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2010)07-0238-04 萘敏己锌滴眼液是含有盐酸萘甲唑啉、马来酸氯苯那敏、氨基己酸和硫酸锌的复方滴眼液，临床上用于防治视疲劳(如因烟雾、灰尘、游泳、紫外线照射、戴角膜接触镜、电脑综合征等引起的视疲劳和结膜充血)，效果明显且使用安全。我国尚未上市，现已完成临床研究。我们建立了用HPLC测定该产品中盐酸萘甲唑啉和马来酸氯苯那敏含量及有关物质，方法简便，准确度高，重现性好，结果令人满意。1仪器与试药 Waters高效液相色谱仪，配有2996 DAD检测器，色谱柱Waters Symmetryshidd C18(3.9mm×l50mm，5μm)。 盐酸萘甲唑啉对照品、马来酸氯苯那敏对照品、萘敏己锌滴眼液，均由山东博士伦福瑞达制药有限公司提供。甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为纯化水。 2　溶液制备 2.1　对照品溶液 精密称取马来酸氯苯那敏、盐酸萘甲唑啉对照品各25mg，分别置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取马来酸氯苯那敏溶液2.5mL及盐酸萘甲唑啉溶液0.5mL，置同-25mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。 2.2　供试品溶液 样品原液为供试品溶液。 3　色谱条件 色谱柱：Waters Symmetryshield C18(3.9mm×150 mm，5μm)；柱温35℃；流速1.0mL／min)流动相：庚烷磺酸钠溶液(庚烷磺酸钠1.0g，加水适量溶解，用水稀释至2000mL，摇匀)一甲醇(60：40)：检测波长230nm；进样量20μL。 此条件下，盐酸萘甲唑啉和马来酸氯苯那敏与杂质均获得基线分离，保留时间：盐酸萘甲唑啉约3.7min，马来酸氯苯那敏约7.3min。对照品、供试品及样品高温破坏后测定的HPLC图谱见图1。 4　方法及结果 4.1　线性关系考察 4.1.1　盐酸萘甲唑啉线性实验 精密称取盐酸萘甲唑啉对照品29.00mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取0.25，0.50，1.00，1.50，2.50mL置5个50mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。取上述溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。得线性回归方程A=9122.132 8+67 074.672 7C，r=0.999 9，n=5。盐酸萘甲唑啉浓度在5.80～58.00μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。 4.1.2　马来酸氯苯那敏线性实验精密称取马来酸氯苯那敏对照品26.50mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取0.1，0.5，1.0，1.5，2.0mL置10mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，备用。精密量取上述溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图及峰面积。得线性回归方程A=-35038.225 3+24416.613 2 C，r=0.9999，n=5。马来酸氯苯那敏浓度在10.60～212.00μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。 4.2　精密度实验 4.2.1　盐酸萘甲唑啉精密度实验 精密量取线性实验中浓度23.2μg／mL溶液20μL注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图及峰面积。RSD=0.15％，精密度良好。 4.2.2　马来酸氯苯那敏精密度实验精密量取线性实验中浓度106.0μg／mL溶液20μL注入液相色谱仪，连续进样6次，记录色谱图及峰面积。RSD=0.15％，精密度良好。 4.3　检出限的测定 4.3.1　盐酸萘甲唑啉检出限测定精密量取线性实验中浓度5.80μg／mL溶液1.0mL，置100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，取5μL注入液相色谱仪，记录色谱图，计算即得。最低检出