反相高效液相色谱法测定烟叶提取物中茄尼醇含量.doc

反相高效液相色谱法测定烟叶提取物中茄尼醇含量摘要：目的建立烟叶提取物中茄尼醇含量的测定方法。方法选择甲醇-乙醇（1:1）为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长211 nm，柱温30 ℃等条件测定茄尼醇的含量。结果在21.6～216.0 mg/L范围内呈线性关系（r=0.999 9）。平均回收率为98.5%，RSD为0.68%。结论此方法简单、迅速，可用于不同含量茄尼醇样品的测定。 关键词：反相高效液相色谱；茄尼醇；含量 中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)04-0018-02 Determination of Solanesol Extracted from Tobacco Leaves by Reversed-phase High-performance Liquid Chromatography WANG Ting, XU Ji-yang*, ZHAO Fang (Biochemistry Teaching and Research Section, China Pharmaceutical University， Nanjing 210009, China) Abstract：Objective To establish a method for the determination of solanesol extracted from tobacco leaves. Methods The mobile phase was a mixture of methanol and alcohol (1:1) with a flow rate of 1.0 mLmin-1, the detection wavelength of 211nm and column temperature of 30 ℃. Results The regression curve was linear between 21.6~216 mg/L (r=0.9999). The average recovery was 98.5% and the RSD was 0.68%. Conclusion The method is simple, quick, and can be used in the determination of solanesol samples with different contents. Key words：reversed-phase high-performance liquid chromatography; solanesol; content 茄尼醇（solanesol）是九聚异戊二烯伯醇，四倍半萜烯醇，分子式为C45H74O，相对分子质量为631。它是一种蜡状白色固体，不溶于水，易溶于多种有机溶剂。茄尼醇广泛存在于高等植物、哺乳动物和微生物体内，如烟叶、马铃薯叶和桑叶中，尤其是烟叶中含量高达0.3%~3% [1] 。 茄尼醇是药物合成的重要原料，是泛醌类药物不可替代的关键中间体，即辅酶Q10和维生素K2的侧链，也能直接作为药物。测定茄尼醇的方法有薄层扫描法[2]、库仑滴定法[3]、电喷质谱法[4]、串联质谱法[5]、高效液相色谱法[6]等。高效液相色谱法应用最为广泛，但是反相高效液相色谱法应用甚少。我们用反相高效液相色谱法测定样品中茄尼醇的含量，以甲醇-乙醇（1:1）作为流动相。此法操作简单，结果准确，重现性好。 1实验部分 1.1仪器和试药 1.1.1仪器岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10AV紫外检测器，C-R6A色谱数据处理机。 1.1.2试药茄尼醇样品：烟叶浸膏经过皂化提取，有机溶剂提取，柱色谱，重结晶等所得，为淡黄色粉末状晶体。茄尼醇对照品：自制，系样品经再次重结晶所得，为白色粉末状晶体。经红外、核磁、质谱表征结构无误，高效液相色谱检测为单一峰，薄层色谱法用两种不同展开剂均为单一斑点。甲醇、乙醇均为分析纯。 1.2色谱条件 色谱柱：VP-ODS柱（250 mm×4.6 mm）；流动相：甲醇-乙醇（1:1）；流速：1.0 mL/min；检测波长：211 nm；柱温：30℃；进样量：2μL。 1.3实验方法 1.3.1对照品溶液的配制精密称取茄尼醇对照品10.8 mg，用甲醇溶解并定容至25 mL。分别取一定量的茄尼醇对照品溶液用甲醇制成浓度为21.6，43.2，86.4，129.6，172.8，216.0 mg/L的系列对照品溶液。 1.3.2样品溶液的配制精密称取茄尼醇样品1.0 mg，用甲醇溶解并定容至10 mL，经0.22μm滤膜过滤