慢性乙型肝炎患者血清中HBeAg水平及HBV-DNA载量相关性分析.docVIP

慢性乙型肝炎患者血清中HBeAg水平及HBV-DNA载量相关性分析作者单位：519000 中山大学附属第五医院 通讯作者：钱明 【摘要】 目的 研究慢性乙型肝炎病毒感染者中HBeAg水平及其HBV-DNA载量的相关性及临床意义。方法 用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）精确定量，检测319例慢性乙型肝炎患者血清中HBV-DNA含量；以化学发光标记免疫法配对检测其血清HBeAg水平。结果 不同HBeAg水平对应的HBV-DNA载量有所不同。HBeAg 1～50（s/co）组的患者其HBV-DNA载量高于0～1（s/co）（即阴性组），但这种差异无统计学意义（P0.05）。将HBeAg水平50（s/co）组患者的HBV-DNA与1～50（s/co）组及0～1（s/co）阴性组比较，发现前者血清HBV-DNA载量明显高于后者（P1 s/co为阳性。 1.4 统计学方法 应用SPSS 10.0进行统计学分析处理，采用χ2检验，P0.05）。将HBeAg水平＞50（s/co）组患者的HBV-DNA载量与1～50（s/co）组及阴性组比较，发现前者血清HBV-DNA载量明显高于后者，差异有统计学意义（P50 s/co患者组，高载量HBV-DNA患者占72.8%。HBeAg 水平试验结果表明，随着HBeAg 水平增高，HBV-DNA的载量也随之增高，由此可以推测HBeAg 的水平可能与HBV在体内的复制有关，也从基因定量水平进一步证实HBeAg确是反映乙肝病毒复制的良好指标［3］。由表1可以看出，部分低水平HBeAg患者其HBV-DNA载量也低，推测这可能是临床治疗中免疫清除期患者较免疫耐受期患者HBeAg和HBV-DNA相对容易双转阴的原因［4］。但低水平HBeAg的患者仍有一定的几率可检出高拷贝的HBV-DNA，说明HBeAg与HBV-DNA的变化并不一致。本次检测中的319例患者中有121例患者HBeAg在0～1s/co间，有30例患者HBV-DNA拷贝数104 copies/ml，提示低水平的HBeAg患者中，并不能说明HBV停止了复制，其原因多是已临床用药，药物治疗有效，HBV-DNA的下降水平相比于HBeAg快得多，而其他原因还有［5］:（1）前C区基因变异，HBV前C区第1896位核苷酸由鸟嘌呤（G）突变为腺嘌呤（A），使前C区第28和原发位密码子TGG变为TAG，从而形成终止密码，使HBeAg合成和分泌发生障碍，使HBeAg合成终止［6］。（2）前C区缺失和插入变异或C区基因变异改变了HBeAg的抗原性，使常规试剂盒检测阴性。（3）X基因区基本核心启动子变异，导致HBeAg水平下降或缺失。（4）HBeAg少量复制而低于检测限。这种HBeAg水平低并不反映HBV复制减轻和传染性消失，相反可能提示有HBV变异株的存在和复制，从而使HBeAg表达缺少，不能认为患者已经进入恢复期。这种血清HBeAg阴性而HBV-DNA水平高的患者在临床上应引为注意，采用更为合理的治疗方案，以免贻误病情。由于受免疫学方法灵敏度的限制，很难检测出低水平状态的HBV复制情况，而PCR法就可以很准确地检测出来。因此，不能仅以ELISA法检测HBeAg阴性或低水平的HBeAg就确定HBV在宿主体内无复制现象，而要以更敏感的检测方法荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量水平，才能更确切地判断HBV复制状况。部分高水平的HBeAg患者中，其血清HBV-DNA检测低，本次检测中81例HBeAg水平50 s/co患者中有22例HBV-DNA复制水平低于104 copies/ml，占27.2%。这可能是因为部分可能与PCR引物相匹配的片段发生基因突变，血清中未检测到所致，又可能是：（1）病毒DNA与宿主肝细胞基因组完全整合，血清中DNA呈现低拷贝量，实验室无法检测，但血清学中HBeAg阳性。（2）处于免疫清除期的晚期阶段，由于免疫应答系统的激活，HBV-DNA被清除，但是HBeAg还没消失。（3）处于残余整合期的早期，有部分患者有低水平的病毒复制，但复制水平可能低于实验室所能检测的极限，但其e抗原系统还表现为弱阳性［7］。因此，HBeAg作为HBV复制的一种血清标志物仍然有重要意义。 临床上以血清感染标志物（乙肝两对半，HBV-M）及荧光定量PCR检测HBV-DNA两种方法作为临床分析和判断乙肝患者病情、疗效及预后各有优劣。仅以HBeAg或HBV-DNA作为复制的血清指标来判断HBV复制和评估传染性有明显局限性，故需综合HBV-DNA和HBeAg判断患者体内病毒的复制状态和机体的免疫状态。所以在临床上更应该正确认识HBeAg水平与HBV-DNA定量的关系，对于判断乙型肝炎病毒复制程度、传染性大小、抗病毒药物疗效、病毒的变化以及预后有参考价值，