活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变模型兔眼IGF-1表达影响.docVIP

活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变模型兔眼IGF-1表达影响(1.湖南中医药大学第一附属医院眼科学重点学科,湖南 长沙 410007;2.上海市嘉定区中医医院眼科,上海 201800; 3.浏阳市集里医院眼科,湖南 浏阳 410300;4.南京市雨花台区妇幼保健所眼科,江苏 南京 210012) 摘 要:目的:观察活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumatic Proliferrative Vitreoretinopathy, tPVR)增殖膜(ERM)中胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)表达的影响。方法:将40只家兔随机抽取32只,造成外伤性PVR模型,随机分成活血利水组、活血化瘀组、利水明目组、模型组,另8只为空白组。连续灌胃28天后,观察眼底PVR分级情况,免疫组织化学方法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在各组的表现及病理组织学改变。结果:在活血利水组,ERM中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)阳性程度低于模型组,差异有非常显著性(P Key words:method of activating blood and dieresis; SXMM tablet; traumatic proliferative vitreoretinopathy; insulinlike growth factor-1 外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumtic proliferative vitreoretino- pathy,tPVR)是指发生孔源性视网膜脱离及穿通性眼外伤后,因创伤修复的过度瘢痕化所引起的牵引性视网膜脱离。在炎症刺激下的纤维组织增生和玻璃体或视网膜在伤口的嵌顿,是其主要的发病机制。tPVR在祖国医学中可归属于“暴盲”、“云雾移睛”或“视瞻昏渺”等范畴,属于“外不见证,从内而蔽”的内障眼病。笔者导师结合长期临床实践,研制出具有活血利水之功效的散血明目片,不仅在临床取得了良好的疗效,且通过严谨的科学实验证实其对兔视网膜具有保护作用。本课题将进一步研究活血利水法对实验性t-PVR模型兔眼胰岛素样生长因子-1(insulinlike growth factor-1,IGF-1)浓度的影响。 1 材料和方法 1.1 实验动物? 有色家兔40只,雌雄各半,体质量2.0～2.5kg,经检查无眼疾,由湖南中医药大学动物实验中心提供。 1.2 药物及试剂? 散血明目片:由三七、酒大黄、蒲黄、防己、猪苓等活血通脉利水明目中药按现代制剂制备工艺制成,0.3g/片,选用同一批号药物,批号:020624。由湖南中医药大学第一附属医院药剂科提供。使用时研成粉末,温开水混合,浓度为100mL含散血明目片12g的混悬液。? 止血祛瘀明目片:由丹参、三七、赤芍、地黄、墨旱莲、茺蔚子、牡丹皮、女贞子、夏枯草、毛冬青、大黄、黄芩(酒炙)等制成,薄膜衣片每片重0.3g,选用同一批号药物,批号:国药准字由陕西摩美得制药有限公司生产。使用时研成粉末,温开水混合,浓度为每100mL含止血祛瘀明目片12g的混悬液。? 猪苓散加减:猪苓10g,泽泻10g,茯苓15g,狗脊10g,大黄10g,栀子10g,滑石10g,车前子15g。原方出自《审视瑶函》。使用时煎成汤剂,浓度为100mL含生药130g。? 兔抗IGF-1试剂盒:由武汉博士德生物工程有限公司提供,编号:PR2318。 1.3 造模方法? 参照万光明等[1]提出的方法,并加以改进。 1.3.1 富含血小板的血浆(platelet-rich plasma,PRP)的制备 用含3.8%枸橼酸钠的玻璃离心管收集健康有色家兔耳缘静脉血(静脉血与枸橼酸钠体积比为9∶1),轻轻摇动混匀,室温下以3000r/min离心5min,取上1/3之上清液,进行血小板计数,获得血小板浓度为5×105～10×105/mL的血浆,即PRP[1]。 1.3.2 有色家兔32只,1%阿托品眼水充分散瞳后,耳缘静脉注射25%乌拉坦4mL/kg。每只兔右眼为实验眼,颞上方注入透明质酸酶0.1mL并反复抽吸,再分离3～9点的球结膜和筋膜,在角膜缘后6mm处用巩膜穿刺刀刺向玻璃体中心部,勿伤及晶状体及周边视网膜,用剪刀向两侧扩大切口,伤口与角膜缘平行达8mm。轻压眼球,将脱离的玻璃体剪除,用8-0尼龙线间断缝合切口。玻璃体腔中央注入0.1mL的PRP(约含70000个血小板)。术毕予地塞米松10mg+庆大霉素2万U各0.1mL球结膜下注射。造模后一周内用0.3%诺氟沙星滴眼药滴右眼,3次/天,0.5%托吡咔胺滴右眼,3次/天。