低剂量顺铂并IFNα对小鼠移植性肝癌血管生成影响.docVIP

　　低剂量顺铂并IFNα对小鼠移植性肝癌血管生成影响 【摘要】 目的 了解持续低剂量顺铂(DDP)联合α干扰素(IFNα)对小鼠移植性肝癌血管生成的影响。方法将48只接种H22肝癌的昆明小鼠随机分为4组，各12只。 低剂量DDP组（DDP组）：腹腔注射DDP 0.2 mL(0.6 mg/kg)；IFNα组（IFN组）：皮下注射IFNα 0.2 mL (2×104 U)；低剂量DDP联合IFNα组（联合组）：腹腔注射DDP 0.2 mL (0.6 mg/kg）并皮下注射IFNα 0.2 mL (2×104 U)；生理盐水对照组（对照组）：腹腔注射生理盐水0.2 mL，每天1次，连续2周。观察肿瘤体积、小鼠体质量的变化和药物毒副反应，采用免疫组织化学方法测定肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 DDP组和IFN组肿瘤生长比较缓慢,联合组抑瘤效果更为明显(F=260.58,q=0.72～1.08，Plt;0.05)，且毒、副反应未增加。与对照组比较，DDP组和INF组的MVD、VEGF表达均下降(F=157.04、 52.97，q=9.55～19.02，Plt;0.05)，联合组下降更显著(q=5.25～9.47，Plt;0.05)。结论 低剂量DDP与IFNα联合应用具有明显的抗血管生成协同作用，抑瘤效果显著，毒、副反应小。 【关键词】 顺铂;干扰素α;肝肿瘤;肿瘤微血管密度;血管内皮生长因子 　　［ABSTRACT］ObjectiveTo evaluate the effect of bined loice a.MethodsFortyeight Kunming mice planted a ized into four groups as DDP group: DDP 0.6 mg/kg，intraperitoneal injection; IFN group: IFNα, 0.2 mL (2×104 U), hypodermic; bination group: DDP, 0.6 mg/kg, intraperitoneal, and IFNα,0.2 mL (2×104 U), hypodermic; control group: normal saline, 0.2 mL, intraperitoneal. All injections e and ors, as ice easured. The expression of microvessel density (MVD) and vascular endothelial groined immunohistochemically.ResultsTumor greor inhibition ore significant in bination group ore dramatic decline observed in bination group (q=5.25-9.47,Plt;0.05). ConclusionLoor inhibition and less side reactions. ［KEY VD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的检测 　　采用免疫组织化学方法。肿瘤组织常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水化后，按试剂盒说明进行PV免疫组化二步法染色。以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性的切片作为阳性对照。 　　1.3.4 染色结果判定 　　MVD：以CD34单抗标记内皮细胞,任何胞浆染成棕色的内皮细胞或内皮细胞团,均按独立的微血管分别计数，是否有管腔不作为计数的必要条件,管腔大于8个红细胞面积或管壁周围有平滑肌包绕的血管不纳入计数范围。计数时先于低倍镜下选择癌灶浸润最明显处,然后在200倍镜下计数5个视野内微血管数目,取其平均值作为MVD[5]。 VEGF的表达：以胞浆内含有棕黄或棕褐色、颗粒状、定位明确且染色明显的瘤细胞为阳性细胞。每只动物均随机选取5张切片，显微镜下每张切片随机观察10个高倍视野(400倍)，每个视野观察100个细胞，记数VEGF的阳性细胞数，计算VEGF阳性细胞表达率。VEGF阳性细胞表达率＝阳性细胞数/计数细胞总数×100%。 　　1.4 统计学处理 计量资料以±s表示，采用SPSS 11.5统计软件对结果进行单因素方差分析。 　　2 结 果 　　2.1 各组小鼠体质量变化和毒、副反应 在整个实验期间，各组小鼠体质量均逐渐增加，但在后期对照组小鼠肿瘤负荷较大，与各用药组比较，体质量增加减慢。给药1周后，对照组小鼠食欲下降，皮毛失去光泽，行动迟缓；各用药组小鼠食欲良好，毛色有光泽，行动灵活，且联合组与DDP组和IFN组之间无明显差别。见表1。表1 各组