河南师范大学细胞生物学第七章108.pptVIP

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河南师范大学细胞生物学第七章108

第七章 真核细胞内膜系统、 蛋白质分选与膜泡运输 本章主要内容 细胞质基质的涵义和功能 细胞内膜系统及其功能 内质网、高尔基体、溶酶体 细胞内蛋白质的分选与膜泡运输 信号假说、蛋白质分选途径 真核细胞结构的基本特征之一是: 细胞内区室化(compartmentalization) 细胞内被分割成三类结构: 1 细胞质基质: 2 细胞内膜系统:(20世纪40年代电镜技术发展) 内质网、高尔基体、溶酶体、分泌泡 3 其他膜包被的细胞器: 线粒体、叶绿体、过氧化物酶体、细胞核 第一节 细胞质基质的涵义和功能 一、 细胞质基质的涵义 细胞质基质(cytoplasmic matrix or cytosol)是细胞的重要结构成分。 细胞与环境、细胞内部的物质运输、能量交换、信息传递需通过细胞质基质完成。 许多中间代谢反应的场所。 P170-172 二、细胞质基质的功能 功能1: 大分子合成和分解的场所 糖酵解、糖原合成、蛋白质合成、分选和运输、脂肪酸的合成等发生在细胞质基质中。 功能2: 细胞质骨架的相关功能。 细胞质骨架 ①与维持细胞的形态、细胞运动、胞内物质运输和能量传递有关, ②是细胞质基质结构体系的组织者,为细胞质基质中其他成分和细胞器提供锚定位点。 功能3: 在蛋白质修饰、选择性降解中起重要作用。 多由专一性的酶作用于蛋白侧链的特定位点。主要有: 辅基或辅酶与酶的共价结合 磷酸化和去磷酸化(调节蛋白的活性) 糖基化(细胞质基质中的主要类型是N-乙酰葡萄糖胺分子加到丝氨酸残基的羟基上) N端的甲基化(保护蛋白,免于降解) 酰基化(脂肪酸链加到蛋白的特定位点上) (1)蛋白质的修饰 (2)控制蛋白质的寿命 在细胞质基质中的蛋白质大多寿命较长,生物活性可以维持数天到数月。但是一些限速酶和癌基因的产物寿命短至数分钟。 蛋白质的氨基酸序列中,有决定其胞内定位和修饰作用的有关信号,而且有决定寿命的信号。 决定蛋白寿命的信号存在于N端的第一个氨基酸残基,如果是Met, Ser, Thr, Ala, Val, Cys, Gly, Pro,蛋白是稳定的。 真核细胞的细胞质基质中,识别和降解蛋白通过依赖于泛素的降解途径(ubiquitin-dependent pathway)完成。 泛素(ubiquitin):是76个氨基酸构成的高度保守的序列,通过其COOH与靶蛋白序列中赖氨酸残基的NH2连接. 组成:20S的催化核心(core) 19S的调节部分(cap) (3)降解变性和错误折叠的蛋白质 异常的蛋白,无论N端的氨基酸残基是否稳定,也常常很快被降解。 (4)帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠成正确的分子构象 主要依靠热休克蛋白(heat shock protein, Hsp or stress-response protein)来完成 Hsp有3个家族,每个家族都有多个成员。 第二节 细胞内膜系统及其功能 细胞内膜系统: 是在结构、功能以及发生上相关的,由膜围绕的细胞器或细胞结构,主要包括内质网、高尔基体、溶酶体、胞内体和分泌泡等。 细胞内膜系统的方法: (1)电镜技术(揭示超微结构) (2)免疫标记/放射自显影(功能定位研究) (3)离心技术(组分分离和分析) (4)遗传突变体分析(膜泡运输及其功能机制) (5) 绿色荧光蛋白的应用 一、内 质 网 (endoplasmic reticulum,ER) 1.形态与功能: 生化方法研究内质网 微粒体(microsome):在细胞匀浆和超速离心过程中,由破碎的内质网形成的囊泡结构,包含内质网膜和核糖体组分,仍具有内质网的基本功能,如蛋白合成及糖基化,脂类合成。 2 基本类型: 在合成旺盛的细胞内,rER总是和线粒体紧密相依。 在间期细胞内,内质网分布和微管走向一致。 4 内质网的功能 (1)rER的主要功能是合成蛋白质。 细胞中蛋白质都是在核糖体上合成的并都是起始于细胞质基质中“游离”核糖体。 一些蛋白是在刚起始合成不久转移到内质网膜上,继续蛋白的合成。在rER上,多肽链边合成边进入内质网腔,主要是: 分泌蛋白 膜整合蛋白 内膜系统细胞器中的可溶性驻留蛋白: 这类蛋白需要和其他细胞组分严格隔离,或者合成后需要进行修饰和加工。 (2) s

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