第一章紫外可见分光光度计课件201009.pptVIP

仪器分析 分光光度技术(分光光度法)主要是指利用物质特有的吸收光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是Lambert和Beer定律。 紫外可见吸收光谱法的应用 可进行定量分析， 可用来对紫外可见光区具有吸收的物质进行定性鉴定和结构分析， 可用于测定有关的化学或物理化学常数，如平衡常数、配合物的配位比等。 利用紫外可见吸收光谱法进行定量分析时，具有以下特点： ①灵敏度高 一般可测定10-6g级的物质，在某些条件下，甚至达10-9g级的物质，适用于微量组分的测定； ②准确度高 相对误差一般可达1％以下； ③选择性好 复杂组分的系统中，不需要分离，即能检测出其中所含的极少量物质： ④操作简便 分析速度快； ⑤应用范围广 可用于无机物和有机化合物的定量测定，不仅用于微量组分的测定，还用于常量组分(用示差分光光度法)和多组分混合物的测定。 第一节 基本原理 三个基本过程： 二、电磁辐射的基本性质 basic properties of electromagnetic radiation 辐射能的特性： 按照产生光谱的物质类型的不同 （1）原子光谱与分子光谱和固体光谱 气态原子发生能级跃迁时，能发射或吸收一定频率的电磁辐射，经过光谱仪所得到的一条条分立的线状光谱，称为原子光谱。 处于气态或溶液中的分子，当发生能级跃迁时，所发射或吸收的是一定频率范围的电磁辐射组成的带状光谱，称为分子光谱。 炽热的固体物质及复杂分子受激后，发射出波长范围相当广阔的连续光谱，称为固体光谱。 （2）吸收光谱与发射光谱 当物质受到光辐射作用时，物质中的分子或原子以及强磁声中的原子核吸收了特定的光子后，由低能态（一般为基态）被激发跃迁到高能态（激发态），此时如将所吸收的光辐射记录下来，得到的就是吸收光谱。 吸收了光能处于高能态的分子或原子，其寿命很短，当它们回到基态或较低能态时，有时重新以光辐射形式释放出来，由此获得的光谱就是发射光谱。 分子光谱（带状光谱）： 当一束紫外可见光(通常为200—800nm)照射分子时，若分子的某些价电子的能级差ΔE电恰好与某一定频率(或波长)的光相适应时(即ΔE电＝E2-E1=hv)，则该频率(或波长)的光被该物质选择性吸收，价电子  能量与频率的关系式如下； E=E1-E2=hv E=分子吸收或发射的辐射能 E1=电子在起始能级的能量 E2=电子在最终能级的能量 h=普朗克常数=6．63×10-27尔格·秒 五、朗伯—比尔(Lambert—Beer)定律1．朗伯定律 -lgT=-lg（It/I0）=lg（I0/It）∝L 将上述比例式写成等式，得到 lg（I0/It）=K1L 式中lg（I0/It）称为吸光度(A)(absorbance)，又称为消光度(E)(degree of extinction)或光密度(D)(optical density)。所以 A=K1L 2．比尔定律 lg（I0/It）=K2C A=K2C 式中C为有色物质溶液的浓度；K2为比例系数，其值取决于入射光的波长，溶液的性质和液层的厚度，以及溶液的温度等。 3．朗伯—比尔定律 如果同时考虑吸收层的厚度和溶液浓度对光吸收的影响，则必须将朗伯定律和比尔定律合并起来，得 lg（I0/It）=KLC A=KLC 第二节 分光光度技术的应用 一、紫外可见吸收光谱与分子结构的关系1、紫外可见吸收光谱与电子跃迁 从化学键性质来看，与紫外可见吸收光谱有关的电子是：成键σ电子、成键π电子和未成键的n电子，这三种类型的电子可用乙醛分子示例如下 当有机化合物吸收光辐射以后，分子中的电子跃迁方式主要有四种类型，即σ→σ*、n→σ*n→σ，n→π*及π→π*。这四种电子跃迁所吸收的能量(△E)的大小关系为 n→π*π→π*≤n→σ*σ→σ* 2、发色团与助色团，长移与短移 （1）．发色团与助色团. 发色团 能够吸收紫外可见光，产生π→π*或n→π*跃迁的基团称为发色团。 助色团 有些基团本身不能够吸收紫外可见光，但它与发色团相连时，可使发色团产生的吸收峰向长波方向移动，吸收强度增强，这类基团称为助色团。 （2）．长移与短移 长移 吸收峰向长波方向移动的这种现象称为长移，又称为红移或深色移动。 短移 吸收峰向短波方向移动的这种现象称为短移，又称为蓝移、紫移或浅色移动。 3、影响紫外可见吸收光谱的因素 （1）．共轭效应 当两个或两个以上的发色团被一个单键隔开形成共轭体系时，由于大π键的形成使各能级间能量差减小，使跃迁所需能量减小，吸收峰的波长长移、吸收强度增加的这种效应称为共轭效应。 （2）．助色效应 当助色团与