第六章原核基因表达调控1.pptVIP

第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 色氨酸操纵子的启动子(P)和操纵序列 (O) 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 色氨酸操纵子的前导肽编码序列(L)和弱化子 (a) 前导肽编码序列 弱化子 前导肽编码序列--具有起始密码子AUG和终止密码子UGA，翻译后应该产生一条含有14个氨基酸的多肽, 这一多肽称为前导肽。 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 2. 特点: (1) trpR(89’)和trpABCDE(25’)不连锁 (2) 操纵序列在启动子内 (3) 有弱化子(attenuator) (4) 启动子和结构基因不直接相连，二者被 前导区顺序(Leader)所隔开 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 色氨酸(-)时: RNA聚合酶与操纵子上的启动子结合 结构基因开始转录 辅阻遏物单体 二聚体 前导序列 弱化子 2. 色氨酸操纵子的调控机制 1) 辅阻遏蛋白的负控阻遏 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 辅阻遏蛋白与色 氨酸结合形成二 聚体。 -二聚体与操纵子 上的O位点结合, 阻碍了RNA聚合 酶与启动子结合。 - 结构基因不表达。 trpR 结构基因 阻遏物二聚体 色氨酸 辅阻遏物二聚体 辅阻遏物单体 RNA聚合酶 色氨酸(+)时: 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 在trp操纵子的阻遏过程中, 效应物 → 色氨酸 ← 阻遏物 可阻遏基因: trp 操纵子上的色氨酸合酶基因的表达可以被它合成 的最终产物(色氨酸)所关闭。这些基因被称为可阻遏 基因。 阻遏酶: trp操纵子上的结构基因所编码的酶称为阻遏酶。 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 2) trp操纵子的弱化(衰减)调节 在研究trp操纵子时发现 - 在色氨酸高浓度和低浓度下观察到trp操纵子的表达 水平相差约600倍; - 使辅阻遏物失活突变, 不能完全消除色氨酸对trp操纵 子表达的影响。 推测trp操纵子的表达受其他调控机制调控, 这种调控与阻 遏物的控制无关。 * 推测trp操纵子的表达受其他调控机制调控, 这种调控与阻 遏物的控制无关。 实验: 如果将O序列和trpE基因之间删除123-150位碱 基序列, 结果发现: trp 基因表达可提高 6-10倍。 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 前导肽序列 具有起始密码子AUG和终止密码子UGA，翻译后应该产生 一条含有14个氨基酸的多肽, 这一多肽称为前导肽。 第10和第11位上有相邻的两个色氨酸。 这两个色氨酸密码子 参与trp操纵子的弱化调节。 弱化子 前导肽编码序列与结构基因trpE之间的一段序列, 类 似终止子序列, 具有转录终止作用, 又称为内部终子。 弱化子 前导肽编码区 前导肽 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 弱化子形成的茎-环结构 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 前导肽区和弱化子mRNA的特点 第一个结构基因 4个片段可以两种不同的方式进行碱基配对形成RNA二级结构: 1-2两片段配对 2-3两片段配对 3-4两片段配对 第六章 原核基因表达调控模式 三.色氨酸操纵子调节机制 当培养基中色氨 酸浓度低时 色氨酰- tRNATrp少， 翻译通过前导序列中 两个相邻色氨酸密码