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菌种制作和保藏 菌种制作及保藏 菌种:是指经人工培养并可供进一步繁殖或栽培使用的食用菌纯菌丝体 我国食用菌菌种生产目前采用母种、原种、栽培种的三级繁育程序 无论制作哪一级菌种，关键应强调无菌操作. 一、接种设备 用于分离与扩大培养各级菌种的专业设备与工具。 （一）接种室：4～8㎡ （二）接种箱：长143㎝、宽86㎝、高159㎝ （三）超净工作台 接种室及接种设备 1．接种室 接种室是用于接种的无菌操作室 2．接种箱 接种箱是一种由木质箱体及可以启闭的玻璃窗构成的接种装置制作筒便，造价低廉，由于体积较小，相同条件下空气消毒的效果优于接种室。 3．超净工作台 超净工作台是一种通过过滤除去空气中的尘埃使空气净化的装置 （四）接种工具 有接种针、接种环、接种钩、接种锄、接种铲、接种耙、接种刀、镊子、接种器等。 （五）酒精灯 （六）培养设备：培养室、培养箱 三、灭菌设备 1．蒸汽灭菌设备 蒸汽灭菌设备是利用其产生的湿热蒸汽进行灭菌的设备。根据所产生的蒸汽压力及工作性能可分为如下两类： (1)高压蒸汽灭菌锅 高压蒸汽灭菌锅 是利用锅内高压 高温蒸汽进行灭菌 的设备。 一、培养基的种类 培养基：是采用人工方法，将食用菌所需要的各种营养物质按照一定比例配制而成的营养基质。 （一）按照培养基的物理性状分 1、液体培养基 2、固体培养基 3、固化培养基：加了凝固剂 （二）按照营养物质种类分 1、天然培养基 2、合成培养基 3、半合成培养基 二、培养基配制的一般原则 第一：含有菌丝生长发育所必须的营养物质，如水、碳源、氮源、无机盐、维生素等； 第二：具有一定的生长环境，包括适宜的pH值与渗透压等； 第三：必须经过严格的灭菌。 三、常用培养基及配制方法 （一）母种培养基：试管培养基；常用的物质有马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂与维生素B1。 母种培养基常用配方： 1、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂18-20克、水1000毫升、pH自然。 2、完全培养基：硫酸镁0.5克、磷酸氢二钾1克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾0.46克、蛋白胨2克、琼脂15克、水1000毫升。 3、麦芽膏酵母膏培养基：麦芽浸膏20克、酵母膏2克、琼脂20克、水1000毫升。 4、稻草浸汁培养基：干稻草200克、蔗糖20克、硫酸铵3克、琼脂18-20克、水1000毫升。 5、普通标准培养基：葡萄糖20克、酵母浸膏2克、蛋白胨10克、琼脂18-20克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克、pH6.5-7.0、水1000毫升。 母种培养基配制的原则 1、营养成分及比例适合该食用菌的生长发育； 2、酸碱度、氧化还原电位适宜； 3、有一定的pH缓冲能力。 母种培养基配制的方法：称量→调配→加入琼脂溶解→加入配方中其他营养物质→pH测定和调整→过滤分装→加棉塞、包扎→灭菌→摆斜面。 （二）原种与栽培种培养基 1、培养基配方 （1）木屑培养基：阔叶树木屑（竹屑）78%、麸皮或米糠20%、糖1%、石膏粉1%。适用于木腐菌的原种、栽培种的培养，如香菇、平菇、木耳、金针菇、猴头、灵芝生产。 （2）棉籽壳培养基：棉籽壳78%、麸皮20%、蔗糖1%、石膏粉1%。适用于金针菇、平菇、凤尾菇、草菇、银耳、木耳、猴头。 （3）甘蔗渣培养基：甘蔗渣75%、麸皮或米糠24%、石膏粉1%。用于平菇、凤尾菇、金针菇、草菇、木耳、白灵菇。 （4）谷粒培养基：以小麦、高粱、玉米等为主料制作的培养基。 ①麦粒10㎏、石膏粉或蘑菇专用肥0.05㎏、生石灰0.1㎏、菌糠1～2㎏。适用于多种菌生产，特别是双胞蘑菇。 注意点：用煮熟但不帐破种皮的麦粒，将菌糠、专用肥、石灰等料加水拌匀，含水量调至60%～65%，然后和麦粒混合均匀即可。 ②小麦98%、碳酸钙2%。除银耳外，其它木生菌、粪草菌均适合。 ③稻草50%、棉籽壳40%、麸皮8%、石膏粉2%。适用于平菇、凤尾菇。 （5）粪草培养基：干稻草63%、干牛粪25%、玉米粉4%、过磷酸钙3%、大豆粉3%、硫酸镁2%。用于蘑菇、草菇。 注意点：将稻草切成3㎝长的小段，浸透捞起，沥干不滴水；将各种原料均匀混合，堆制20天，中间翻堆3～4次（6）木块木条培养基：木条10㎏、蔗糖0.1㎏、麸皮或米糠2㎏、碳酸钙0.05㎏。适用于多种木腐菌的原种、栽培种的培养。 注意点：将木条在1%的蔗糖水中浸泡12～24小时或煮沸30分钟，捞出后和其它料拌匀，装瓶即可。 2、原种与栽培种培养基的制备 （1）称料与拌料 （2）装瓶或装袋 （3）灭菌 一、概念 1、 灭菌 ：在一定范围内彻底杀灭物料及其容器中的一切微生物。 2、消毒： 用物理或化学的方法，消灭物体表面或环境中一部分微生物的措施。也称简易非彻底的灭菌。在医学上泛指对病