理气化痰祛瘀方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠血清TNF-α CRP影响.docVIP

理气化痰祛瘀方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠血清TNF-α CRP影响摘要：目的：观察理气化痰祛瘀方对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠血清肿瘤坏死因子（TNF-α）、C-反应蛋白（CRP）的影响，探讨其可能作用机制。方法：以高脂饮食喂养SD大鼠12周，建立大鼠NASH模型，用不同剂量的理气化痰祛瘀中药干预，检测肝组织匀浆TC、TG的含量和血清ALT、AST水平，常规HE染色观察肝组织的病理改变，放免法和免疫比浊法分别检测血清TNF-α和CRP的水平。结果：模型组大鼠肝组织出现明显的脂肪变和炎症细胞浸润，其肝组织匀浆中TC、TG的含量及血清ALT、AST、TNF-α、CRP水平均明显高于正常对照组，血清CRP浓度和肝脏炎症活动度计分呈明显的正相关；应用理气化痰祛瘀方干预可改善NASH大鼠炎症活动程度，同时血清ALT、AST、TNF-α、CRP水平也显著降低。结论：TNF-α、CRP参与高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎的发生，理气化痰祛瘀中药能显著降低大鼠血清TNF-α、CRP水平，控制NASH的发展。? 关键词：非酒精性脂肪性肝炎；理气化痰祛瘀方；TNF-α；CRP；大鼠? 中图分类号：R285 文献标识码：A 文章编号：1673-7717（2007）04-0730-03 随着人们生活水平的提高，以转氨酶升高为主要临床表现的非酒精性脂肪性肝炎(non alcoholic steatohepatitis, NASH)的发病率逐年上升。但迄今为止，NASH尚缺乏有效的治疗方法，中医药在其治疗上显示了一定的前景。本研究通过高脂饮食建立大鼠NASH模型，观察理气化痰祛瘀中药对其的疗效，并从炎症因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、C-反应蛋白（CRP）角度探讨理气化痰祛瘀方药防治NASH的可能的作用机制。? 1材料与方法? 1.1实验动物SD大鼠50只，雄性，SPF级，体重190～210g，由中科院上海实验动物中心提供。? 1.2主要试剂与药品胆固醇，上海伯奥生物科技有限公司产品，批号050204；3号胆盐，杭州微生物试剂有限公司产品，批理气化痰祛瘀方由生山楂、广郁金、桃仁、泽泻、海藻、香橼、象贝、莱菔子、茯苓等组成，由浙江省中医院中药制剂室制成流浸膏。易善复，德国A.Nattermann＆cie.CmbH产品，批号46940B。TNF-α放免试剂盒，解放军总医院科技开发中心放免所产品，批号为050925；CRP免疫比浊法试剂盒，上海太阳生物技术有限公司产品，批号为723007。? 1.3NASH大鼠模型的建立高脂饲料(由10%猪油、2%胆固醇、1%胆盐、5%蛋黄粉及82%普通标准饲料组成)连续喂养12周建立NASH大鼠。? 1.4分组及给药50只大鼠随机分正常组、模型组、易善复组、中药高剂量组及中药低剂量组共5组，每组10只；正常组以普通标准饲料喂养，同时灌服等容量蒸馏水；模型组在造模的同时灌服等容量蒸馏水；易善复组在造模同时予灌服97.7 mg/（kg#8226;d）易善复混悬液；中药高、低剂量组在造模的同时分别灌服理气化痰祛瘀中药26g/（kg#8226;d）及13g/（kg#8226;d）；均连续12周。? 1.5观察指标及评定标准肝组织常规HE染色，光镜观察肝组织脂肪变性的程度[1]，根据肝组织脂肪变性的程度分为阴性~重度脂肪肝。炎症活动度计分标准参照王泰龄等慢性肝炎炎症活动度及肝纤维化程度计分方案[2]在光镜观察进行评分。血清CRP采用免疫比浊法测定；血清TNF-α采用放免法测定，严格按照试剂盒操作步骤进行。 ? 1.6统计方法 采用SPSS11.5软件包统计，计量资料用均数（）±标准差( s)表示，采用方差分析、q检验；两因素之间关系采用直线回归求相关系数。? 2结果? 2.1理气化痰祛瘀方对NASH大鼠肝组织学的影响 光镜下显示正常组大鼠肝组织无明显异常；模型组大鼠肝组织可见弥漫性肝细胞脂肪变，并有肝细胞气球样变，程度均为重度，伴小叶内炎症及汇管区有炎细胞浸润，以小叶内炎症明显，部分大鼠小叶内坏死灶融合成片，并有碎屑样坏死，但未见肝纤维化形成。各中药干预组大鼠肝组织也见重度脂肪变性，与模型组比差异无显著性（P0.05）；肝组织的炎症分布和性质与模型组相似，但程度明显减轻；其炎症活动度计分较模型组显著下降（P 1