解毒祛瘀滋阴方对佐剂性关节炎大鼠TNF-a影响.docVIP

解毒祛瘀滋阴方对佐剂性关节炎大鼠TNF-a影响摘要：目的：通过观察解毒祛瘀滋阴方对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用，进一步评价解毒祛瘀滋阴方治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)的疗效。方法：观察了解毒祛瘀滋阴方对佐剂性关节炎大鼠的影响。结果：解毒祛瘀滋阴方能明显押制大鼠佐剂性关节炎病变，解毒祛瘀滋阴方可明显下调佐剂性关节炎大鼠TNF－a的水平。 关键词：大鼠佐剂性关节炎；解毒祛瘀滋阴方；系统性红斑狼疮；TNF－－Or 中图分类号：R285.5 文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2008)01－0125－02 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种累及多系统、典型的自身免疫性疾病。临床上多以先天肾阴亏损、阴虚火旺的内因为本病之本，根据病情发展的阶段不同，累及的脏腑各异，其辨证治法和用药差别较大。范永升教授根据多年临床经验，采用解毒祛瘀滋阴法治疗SLE，在临床上取得较好的疗效。本课题根据其“肾虚阴亏，而热毒、血瘀为其标”的病因病机，观察滋阴解毒祛瘀法对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用，以期能为解毒祛瘀滋阴方治疗SLE提供客观实验依据。 1　材料 1.1　动物Wistar大鼠，体重(200±20)g，由浙江中医药大学实验动物中心提供。 1.2　药品与试剂实验所用中药材均购于浙江中医药大学附属医院门诊部，按常规方法煎煮两次，4℃冰箱保存备.用。强的松，5mg／片，浙江仙琚制药股份有限公司生产，批号：050459。卡介苗，上海生物制品研究所生产，批号：200506001。石蜡油，江苏鸿声化工厂，批号羊毛脂，上海华亭羊毛脂厂，批号020201。Freunds完全佐剂和卵白蛋白－Freunds完全佐剂根据《药理学实验方法学》配制。TNF―a试剂盒，上海森雄生物试剂公司。批号0512124。 2　方法 2.1　佐剂性关节炎大鼠模型的建立Wistar大鼠60只。雌雄各半，体重(180+20)g，随机分为6组(每组10只)：正常组(等容积生理盐水)、模型组(等容积生理盐水)、中药低剂量组[14g／(kgd)]、中药高剂量组[28g／kgd)]、中药高剂量+半量强的松组[28g/(kgd)+1.25mg／(kgd)]、强的松组[2.5mg／(1cgd)]。 将液体石蜡和羊毛脂(2：1)共热至70℃，振摇，高压灭菌。然后按每毫升加入卡介苗7.5mg制成Freunds完全佐剂每组(正常组除外)大鼠右足后跖皮内注射Fretmds完全佐剂0.1mL致炎。致炎后第1天、第11天测右足后跖厚度，第18天称重，并测右足后跖厚度。致炎后第19天开始灌胃给药，连续给药10天。给药前后测右足后跖厚度。 2.2　TNF―a的测定采用酶联免疫吸附实验方法，具体流程如下：①向96孔板孔内加100uL血清；②放置2h，洗板后，每孔加第一抗体工作液50ul；③放置1h，每孔加酶标抗体工作液100v.L，1h后，每孔加底物工作液100ul；④10rain后用酶标仪检测490rim的OD值。 2.3　统计学处理数据均用(x±s)表示，采用统计软件SPSS 11.5进行统计学分析，单因素方差分析进行组间比较。 3　结果 3.1　解毒祛瘀滋阴方对大鼠佐剂性关节炎肿胀度的影响 用药前大鼠右后足跖厚度正常组显著低于其它组(P0.05)(见表1)。表明解毒法瘀滋阴方能明显抑制大鼠佐剂性关节炎病变，解毒祛瘀滋阴方合用减量激素能提高疗效。 3.2　解毒祛瘀滋阴方对大鼠血清TNF―a的影响　正常组与模型组比较差别显著(P0.01)；模型组与中药高剂量+半量强的松组与强的松组比较差别显著(|P0.01)(见表2)。表明解毒祛瘀滋阴方对TNF―a具有下调作用.通过下调大鼠TNF－a来降低炎症反应。 4　讨论 目前糖皮质激素是治疗SLE最有效的药物之一，但是长期使用糖皮质激素会产生许多副作用，中医药在有效治疗sLE并能降低副作用的优势日益显现。虽然中医对SLE的治疗有以上诸多分型，但临床SLE患者多肾精不足，同时后天又多感受温毒之邪。热毒易伤阴。热毒与阴亏又易导致血瘀的发生。SLE患者既有红斑、皮疹、烦躁、发热等热毒症状，又有腰酸耳鸣、月经不调等肾阴虚表现，同时又往往伴有斑疹色暗、闭经、脉涩等血瘀之候。反映出本病肝肾阴虚为本，热毒、血瘀为标的特征。从治疗学角度来看，清热解毒有利于阴液的恢复补益肾阴增强正气，也有利于热毒之邪的祛除，祛瘀既有利于祛除热毒之邪，也有利于阴液滋生，故清热解毒、滋阴益肾、活血祛瘀在治疗本病过程中是相得益彰的。目前，在对SEE的实验研究中，因狼疮动物模