蛋白质组学在脾虚证探究中应用.docVIP

蛋白质组学在脾虚证探究中应用摘要：介绍了近10年来脾虚的研究概况，从蛋白质学的特点和脾虚证研究中存在的问题着手，阐述了蛋白质组学在脾虚证研究中的重要性及研究思路。 关键词：蛋白组学；脾虚证；研究思路 中图分类号：R2－03 文献标识码：A　文章编号：1673－7717(2008)01－0018－02 传统中医理论认为，脾为后天之本，主运化，为气血生化之源，脾主肌肉四肢，开窍于口。现代研究认为，脾(胃)是以消化系统为主的多系统、多器官的综合功能单位，涉及现代医学消化吸收、水盐代谢、能量转换、神经、内分泌、免疫、血液、运动功能等。由于脾(胃)功能的重要性以及脾虚证涉及众多的疾病和复杂的病理变化，脾虚证作为证候学研究的重要课题一直是中医临床和基础研究的重点。 1　脾虚证的研究概况 脾虚证是中医临床最为常见的证候之一，脾虚证的现代研究一直是中医基础理论研究中的重要内容。近几十年来脾虚证的本质研究取得了显著成果，关于脾虚证候发生发展的机理有人提出许多学说，涉及到70余项生化指标的变化。 1.1　脾虚证与消化道各种异常改变有关专家们认为。脾虚证与消化道的病理改变、消化功能下降、胃肠道黏膜保护性屏障作用减弱及胃肠道激素水平紊乱等密切相关。如彭成等研究发现，脾虚模型组大鼠空肠上皮细胞微绒毛肿胀、脱落、数量减少、排列紊乱，这可能是导致小肠吸收功能低下的原因所在。王洪海等采用游泳劳倦加饮食失节法造模，发现脾虚大鼠造模3周后可出现多种胃肠激素如生长抑素、血管活性肠肽(VIP)、B－内啡肽(B－EP)、神经肽Y(NPY)水平的异常变化。严茂祥等研究发现脾虚证大鼠结肠组织中生长抑素(ss)含量较正常组明显增高，胰高糖素(Glu)含量较正常组明显降低，神经肽Y(NPY)、血管活性肠肽(VIP)及P物质(SP)与正常组无显著差异，认为胃肠激素的改变对脾虚证的发生可能起着重要的直接或问接作用。宋述财等运用“胃肠电检测系统”观察脾虚湿困及其它脾胃虚实证的胃电频谱变化，分析胃动力改变，结果发现脾胃气虚证患者胃电减弱。进餐反应延迟。李燕舞等在探讨大黄脾虚模型大鼠即时分离的胃壁细胞电镜下可见明显扩张的分泌小管，小管内可见增长密集的微绒毛，但囊泡状结构少见。程学仁等采用细胞形态立体计量学的方法，对脾虚证患者十二指肠吸收细胞的线粒体进行研究，发现脾虚证与十二指肠吸收细胞线粒体的改变有一定关系。宋于刚等对慢性胃病为主的脾虚患者胃窦黏膜进行研究，发现其分泌的G、D细胞数均减少，D细胞面积缩小，G／D细胞数和细胞面积比值均增高，因而认为G、D细胞的变化可能是慢性胃病脾虚证胃肠功能障碍的一个重要病理机制。 1.2　脾虚证与免疫功能低下有关专家们研究后认为脾虚证患者及动物模型均存在不同程度的非特异性免疫、细胞免疫功能低下，体液免疫功能紊乱，消化道局部免疫功能下降等异常。林心舜等在实验中测定了脾虚模型小鼠免疫器官重量和吞噬细胞功能的变化，结果发现，与正常小鼠相比，脾虚小鼠脾、胸腺重量以及全血白细胞、腹腔巨噬细胞的吞噬功能显著低下，提示脾虚的发生与免疫功能低下有着密切关系。王洪海等采用复合病因(过度劳倦加饮食失节)造模法，造成脾虚证大鼠模型，造模3周后大鼠的体重、胸腺、脾重量明显降低，恢复１周后未见明显恢复，血清细胞因子水平出现了白细胞介素－1B(IL－1B)降低、白细胞介素6(IL－6)、白细胞介素－2(IL－2)、TNFa的紊乱变化现象。丁洁实验证实。脾虚证患者外周T淋巴细胞的分化增殖能力下降，末梢血中T淋巴细胞总数、辅助性T淋巴细胞明显减少，抑制性T淋巴细胞相对增多，说明脾虚患者细胞免疫功能降低，免疫调节机制紊乱。章梅等采用化学发光测定和分析的方法，证明脾虚证小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞免疫功能下降，经四君子汤治疗后腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞免疫功能明显恢复和增强。温庆祥等研究发现，脾虚证患者血清白细胞介素一4(IL－4)、白细胞介素－8(IL－8)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(1gA)水平不同程度降低，其免疫功能下降，经四君子汤治疗后均较治疗前明显升高。 1.3　脾与证与基因改变基因技术是近10年来发展最快的科研手段之一，在中医“证”实质的研究中得到了广泛应用。王肃等应用基因芯片技术研究利血平脾虚证大鼠模型大脑皮层基因表达谱的变化，发现筛选出两张芯片上4096条靶基因中，脾虚证模型基因差异表达一致的基因145条，占检测基因的3.54％，其中已知基因表达上调的有27条，表达下调的有20条。初步分析后认为，模型大鼠大脑皮层的基因表达改变涉及免疫、细胞骨架运动、能量代谢、蛋白合成和细胞内信号转导等多个方面，提示脾虚证实质涉及大脑皮层的基因表达谱改变。钱会南等采用苦降泻下、饮食失节和劳倦过度法建