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超工频交变衰减磁场及组织处理
超工频交变衰减磁场及组织处理摘 要 方法:采用超工频交变衰减磁场(UFAWMF)对组织固定脱水透明浸蜡等处理过程进行了实验观察。结果:UFAWMF 组组织脱水指数(0.44831±0.04696)与常规组组织脱水指数(0.45327±0.05266)间无统计学差异(P0.05)。而且,从外观上看,UFAWMF组组织外形变化不明显且有一定的柔韧性,而常规组有较明显的收缩且质地较硬。UFAWMF组制片及染色效果满意。明显优于常规组。结论:UFAWMF可以用于组织处理。
关键词 超工频交变衰减磁场 组织处理
材料与方法
标本来源与处理过程:取尸体心脏、肝脏、脾脏和肾脏组织各40块,每块约20mm×20mm×3mm,按脏器随机分为两组,即UFAWMF组和常规组,每组80块组织。UFAWMF组的组织处理缸置于JDM-1型退磁机(北方磁力公司,220W)中,而常规组采用《医疗护理操作常规》的处理方法。UFAWMF组的组织处理程序与时间分别为:10%福尔马林10分钟、85%乙醇5分钟、90%乙醇10分钟、95%乙醇10分钟、100%乙醇Ⅰ5分钟、100%乙醇Ⅱ10分钟、二甲苯10分钟、二甲苯蜡5分钟、石蜡Ⅰ5分钟、石蜡Ⅱ10分钟,总用时80分钟;常规组组织处理程序与时间分别为:10%福尔马林240分钟、85%乙醇90分钟、90%乙醇90分钟、95%乙醇90分钟、100%乙醇Ⅰ90分钟、100%乙醇Ⅱ90分钟、二甲苯30分钟、二甲苯蜡30分钟、石蜡Ⅰ60分钟、石蜡Ⅱ120分钟,总用时930分钟。
各组标本经福尔马林固定后,用吸纸吸干组织表面水分,按组分类编号并用分析天平(精度0.0001g)称重、记录后用等大镜头纸包裹进入各自的流程。完成100%乙醇Ⅱ脱水后,各组按编号随机抽取每种组织10块,分别用分析天平称重后记录,余标本继续进行透明浸蜡和包埋制片。操作时分别记录每缸结束温度。切片分别进行HE、AgNOR、PATH染色。
实验室条件:实验室室温18℃,相对湿度83.9%,液体初始温度为18℃。
统计学方法:将称取的质量换算求得组织脱水指数。组织脱水指数=组织脱水前后质量差/组织脱水前质量。然后,所得数据进行t检验,作组间差异性检验。
结 果
组织处理过程中液体的温度变化:UFAWMF组,10%福尔马林34℃、85%乙醇40℃、90%乙醇45℃、95%乙醇49℃、100%乙醇Ⅰ55℃、100%乙醇Ⅱ58℃、二甲苯60℃、二甲苯蜡无变化、石蜡Ⅰ65℃、石蜡Ⅱ65℃;常规组,10%福尔马林18℃、85%乙醇18.5℃、90%乙醇18.5℃、95%乙醇19℃、100%乙醇Ⅰ19℃、100%乙醇Ⅱ19℃、二甲苯19℃、二甲苯蜡65℃、石蜡Ⅰ65℃、石蜡Ⅱ65℃。
组织脱水程度:UFAWMF组脱水指数为0.44831±0.04696(X[TX-]±S),常规组脱水指数为0.45327±0.05266,组间无统计学差异(P0.05)。从外观上看,UFAWMF组组织外形变化不明显且有一定的柔韧性,而常规组有较明显的收缩且质地较硬。
制片及染色效果:UFAWMF组和常规组皆可制出2~5μm的平整的薄片。从染色方面看,UFAWMF组和常规组常规及特殊染色效果相同。免疫组化5-羟色胺的阳性细胞数及阳性程度明显优于常规组。
工作效率:UFAWMF组把组织处理用时从常规组的930分钟缩短到目前的80分钟,提高工作效率11.6倍之多。
讨 论
UFAWMF以往主要用于钢铁、煤炭、石油等工业。近年来由我们率先用于医学领域,早期用于动物实验研究,现今已用于临床治疗。
为拓宽UFAWMF的应用领域,我们将其用于组织的脱水固定透明浸蜡,结果表明UFAWMF对组织的处理过程有明显的加速作用。其机理可能是:①与UFAWMF所产生的电磁振荡有关。陈氏等报道,机械振荡有利于组织的固定脱水。近年也有高频电磁振荡(如微波)加速组织固定脱水透明浸蜡的报道。而UFAWMF具有两种频率的电磁振荡,一个是交变磁场频率(700Hz),另一个是最高磁场强度的衰减变化频率(50Hz),因此出现了振荡间歇,从而进一步提高了组织固定脱水透明浸蜡的效果。②电磁振荡产生的热量也是加速组织处理过程的影响因素。众所周知,提高温度可加快组织处理过程,但达不到满意效果,且单纯加温可使组织变脆、变硬或收缩变形,从而加大了制片和阅片难度。本研究中UFAWMF组较室温提高了16~47℃,提高了脱水等组织处理过程的效率。③电磁振荡能够影响液体的疏水性、氢键和范德华力,从而也加速了组织的处理过程。④电磁振荡能增强膜的通透性及提高极性分子对组织的穿透能力,基于异性相吸的原则,使溶剂和组织内部分子间快速交换,从而达到组织快速固定脱水透明浸蜡的目的。
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