青少年肥胖及糖代谢异常及PPARγ2基因多态性相关性探究.docVIP

青少年肥胖及糖代谢异常及PPARγ2基因多态性相关性探究【摘要】 目的 探讨青少年肥胖和糖代谢异常与过氧化物酶增殖物活化受体γ（PPARγ）基因Pro12Ala多态性的相关性，为探讨肥胖病因和预防控制肥胖提供理论依据。方法 选择北京市东城区14～17岁初中生955名，进行身体测量、血糖测定和Pro12Ala多态性检测。结果 Pro12Ala等位基因突变率（P＞A）为6.7%；Pro12Ala基因型及等位基因频率在体重正常、超重和肥胖3组间差异无统计学意义（P＞0.05）；重度肥胖（BMI≥30 kg/m2）青少年与体重正常者比较，基因型构成和等位基因频率差异有统计学意义（P＜0.05）；肥胖组中不同基因型的BMI、腰臀比、腰围和腰围身高比水平差异存在统计学意义（P＜0.05），分性别比较，仅发现肥胖组男生Ala等位基因携带者这些指标水平较高（P＜0.05）；肥胖组空腹血糖异常组Ala频率要高于空腹血糖正常组（P＜0.05）。结论 Pro12Ala等位基因突变率与已有汉族人群研究结果相近，其多态性与肥胖有关，与肥胖的协同作用可能导致糖代谢异常。男生Ala等位基因携带者更易发生中心型肥胖，提示性别可能有一定的效应修正作用。 【关键词】 多态性，单核苷酸；基因；肥胖症；葡萄糖代谢障碍；青少年 【中图分类号】 R 151.1 R 589.1 Q 987 【文献标识码】 A 【文章编号】 肥胖是一种营养代谢性疾病，是由能量的摄入和消耗不平衡造成的，已经成为影响我国儿童青少年健康的重要公共卫生问题。肥胖者常伴有脂代谢、糖代谢紊乱和高血压等，这种聚集现象被称为代谢综合征（MS），是成年期心血管疾病发生的重要危险因素，二者可能存在共同的多基因遗传基础。过氧化物酶增殖物活化受体γ（peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ）是肥胖导致胰岛素抵抗的重要转录因子之一，在脂肪细胞分化过程中起着关键作用，并参与脂代谢相关基因的表达调控。自从1997年Yen等［1］在PPARγ2 基因中发现了Pro12Ala多态性以来，国内外有很多研究针对不同人群探讨PPARγ2基因Pro12Ala多态性与肥胖和代谢综合征的关联，结论尚不确定［2-4］。为了解我国青少年肥胖、糖代谢与该基因位点的相关性，笔者对北京地区955名青少年进行了研究，为探讨肥胖和糖代谢异常的遗传机制以及预防控制肥胖提供依据。 1 对象与方法 1.1 对象 采用整群抽样法，从北京市东城区9所中学选择955名14～17岁初中生为研究对象［5］，其中体重正常170名，超重400名，肥胖385名；男生612名，女生343名。根据既往检查资料和询问病史，剔除患心血管及内分泌疾病的青少年。 1.2 方法 1.2.1 身体测量及超重、肥胖的判定 对所有研究对象进行身高、体重、腰围、臀围的测量，测量方法参照《2000年中国学生健康与体质调研检测细则》进行。根据测量结果，计算身体质量指数（BMI）、腰臀比（WHR）、腰围身高比（WHtR）。超重、肥胖的判定采用中国肥胖问题工作组制定的“中国学龄儿童青少年超重、肥胖BMI筛查分类标准”。参考孟玲慧等［6］提出的北京市3～18岁人群的腰围（WC）适宜界值为性别年龄组的第80百分位值,腰围身高比（WHtR）的适宜界值为0.46，以此作为中心型肥胖的界值点。 1.2.2 血糖测定 由专职人员采清晨空腹（禁食12 h）静脉血3 mL，于室温下凝固离心后，用HITACHI 7060型自动生化分析仪测定空腹血糖（FPG），采用氧化酶-过氧化物酶法。应用国际糖尿病协会2005年指定的代谢综合征标准，判定儿童青少年血糖水平是否异常［7］。 1.2.3 PPARγ2基因Pro12Ala多态性检测 采用常规酚/氯仿法从血凝块中提取DNA。参考文献［8］，用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析方法，对PPARγ2基因Pro12Ala多态性进行检测。PCR引物由北京奥科生物技术公司合成。正向引物序列为5-CAAGCCCAGTCCTTTCTGTG-3’，反向引物序列为5-AGTGAAGGAATCGCTTTCAG-3’PCR反应体系为25 μL，Taq聚合酶1U。PCR扩增条件为： 94 ℃预变性5 min，接着进行94 ℃变性30 s，62 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s共30个循环，最后72 ℃延伸5 min。PCR产物用5U限制性内切酶MspⅠ于37 ℃过夜酶切。酶切产物用EB染色的2.5%琼脂糖凝胶电泳进行基因型鉴定，3种基因型酶切产物分别为野生纯合型（CC）（224bp，43bp）、突变杂合型（CG）(267bp，224bp,43bp) 及突变纯合