外源性p16基因导入对人肝癌细胞侵袭相关蛋白表达和迁移能力影响.pdf

外源性p16 基因导入对人肝癌细胞 侵袭相关蛋白表达和迁移能力的影响 研究生 ：石丽娟 导 师 ：朱建思 教授 中文摘要 目的：探讨外源性p16 基因导入对人原发性肝癌SMMC-7721 细胞侵袭相 关蛋白VEGF 、nm23 、MMP-9 及TIMP-1 表达和其迁移能力的影响。 方法：细胞划痕和 Transwell 法检测外源性 p16 基因导入对人肝癌细胞 SMMC-7721 迁移能力的影响；免疫细胞化学法分析外源性p16 基因导入对VEGF 表达的影响；Western blot 法分析外源性p16 基因导入对nm23 、MMP-9 和TIMP-1 表达的影响。 结果：细胞划痕实验检测显示，外源性 p16 基因导入人肝癌细胞 SMMC-7721 后，转染p16 基因的SMMC-7721 细胞迁移能力较空载体对照组和空 白对照组SMMC-7721 细胞明显下降；Transwell 小室迁移实验分析亦显示，稳定 转染 p16 基因的人肝癌 SMMC-7721 细胞迁移至滤膜下表面的细胞数减少为 39.5±2.72 个/视野，与空载体对照组（132.4±6.73 个/视野）和空白对照组（133.7±3.18 个/视野）SMMC-7721 细胞之间有显著性差异（P0.05 ）。免疫细胞化学检测显示， 外源性p16 基因导入人肝癌 SMMC-7721 细胞后，转染p16 基因的SMMC-7721 细胞其VEGF 表达较空载体对照组和空白对照组SMMC-7721 细胞减弱（P0.05 ）； Western blot 分析显示，外源性p16 基因导入人肝癌SMMC-7721 细胞后，转染p16 基因的 SMMC-7721 细胞其 nm23 、TIMP-1 表达较空载体对照组和空白对照组 SMMC-7721 细胞增强 （P0.05 ），而其 MMP-9 表达则较空载体对照组和空白对 照组SMMC-7721 细胞减弱 （P0.05 ）。 结论： ⑴外源性 p16 基因导入人肝癌细胞株 SMMC-7721 细胞，可抑制人肝癌细胞 SMMC-7721 的体外迁移能力，减慢其运动能力。 ⑵外源性p16 基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721 细胞可下调VEGF 的表达。 2 ⑶外源性p16 基因导入人肝癌细胞株SMMC-7721 细胞可上调nm23 的表达。 ⑷外源性 p16 基因导入人肝癌细胞株 SMMC-7721 细胞可下调 MMP-9 、上调 TIMP-1 的表达。 关键词： 肝肿瘤；p16 ；迁移；VEGF ；nm23 ；MMP-9 ；TIMP-1 3 The Effect on Expression of Invasion relative Proteins and Migration Ability in Human Hepatocellular Carcinoma cell transfected with Exogenous p16 Abstract Objective: To investigate the effect on expression of invasion relative proteins and migration ability in human hepatocellular carcinoma cell transfected with Exogenous p16. Methods: The effect on migration ability of Human Hepatocellular Carcinoma cell transf