一株类禽型H1N1亚型猪流感病毒的反向遗传系统的建立.pdfVIP

第 35 卷第2 期 中国预防兽医学报 Vo l. 35 ,No.2 2013 年 2 月 Chinese Joumal of Preventive Veterinary Medicine Feb. 2013 doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2013.02.02 一株类禽型 H1N1 亚型猪流感病毒的反向遗传系统的建立 孟沙沙，乔传玲\陈 艳，杨焕良，刘丽萍，尹航，辛晓光，陈化兰· (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室，黑龙江哈尔滨 150001) 摘 要:为建立 HINl 亚型猪流感病毒Alswine/JiangsuJ40/20 11 (1S40) 的反向遗传系统，本研究分别构建了 JS40 株 8 个基因节段的重组质粒，经转染 293T 和 MDCK 混合细胞，拯救出病毒R-JS40。序列测定结采表明，救 获病毒与亲本病毒的核普酸序列一致，无氨基酸变异，可以稳定传代;抗原性未发生变化;对小鼠的致病性结果 显示 R-JS40 与 JS40 对小鼠的组织嗜性以及在肺脏中复制的病毒滴度基本一致。以上结果表明 R-JS40 保持了亲本 病毒 JS40 的生物学特性，该病毒反向遗传操作系统的建立，为进一步开展病毒的致病分子基础以及新型疫苗的 研制提供有效的技术平台。 关键词:猪流感病毒;类禽型; HIN1; 反向遗传系统 中图分类号: S852.65 文献标识码:A 文章编号: 1008-0589(2013)02-0091-04 Establishment of reverse genetic system for an avian-like swine H1 N1 influenza virus MENG Sha-sha, QIAO Chuan-ling , CHEN Yan , Y ANG Huan-liang , LIU Li-ping , YIN Hang , XIN Xiao-guang , CHEN Hua-lan (Animal Influenza Laboratory of the Minis町 of Agricultural , State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology , Harbin Veterinary Research Institute , Chinese Academy of Agricultural Sciences , Harbin 150001 , China) Abstract: To establish the reverse genetic system of an avian-like swine HINI influenza virus , the recombinant plasmids containing the eight gene sequences of Alswine/Jiangsu!40/2011 (JS40) were constructed. The rescued virus , designated as R-JS40 , was genera时 by co-transfecting the eight plasmids into the MDCK and 293T mixture cells. The resultant virus was passaged twice in embryonated eggs and confirmed by sequencing. The R-JS40 presented the similar antigenic ch