紫外-可见分光.ppt

⒎双波长与单波长分光光度计的主要区别是（ ） A.光源个数 B.单色器个数 C.吸收池个数 D.单色器及吸收池个数 ⒏某试液用2.0cm的比色皿测量时T = 60%,若用 1.0cm、3.0cm和4.0cm的比色皿测定时，吸光度、 透光率各是多少？ 掌握内容： ⒈紫外-可见吸收光谱产生的原因及特征； ⒉电子跃迁类型； ⒊吸收带的类型、特点、影响因素及基本概念； Lambert-Beer定律的物理意义、成立条件、偏离因 素及有关计算； ⒋紫外-可见分光光度法单组分定量的各种方法； ⒌多组分定量的线性方程组法和双波长法。 ? 熟悉内容： ⒈紫外-可见分光光度计的基本部件、工作原理 及光路类型； ⒉紫外-可见分光光度法对化合物进行定性鉴别 和纯度检查的方法； ⒊多组分定量的其他方法。 了解内容: ⒈紫外光谱与有机化合物分子结构的关系； ⒉光电比色法的原理及应用。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和 结果处理。 二、分光光度计的类型 ⒈单光束： 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度 或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求 光源和检测器具有很高的稳定性。 二、分光光度计的类型 2. 双光束： 自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不 稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别 适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。 二、分光光度计的类型 3.双波长： 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交 替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流 信号。无需参比池。△?=1～2nm。两波长同时 扫描即可获得导数光谱。 第三节 紫外-可见分光光度分析方法一、定性分析 ⒈对比吸收光谱特征数据 通过对未知纯试样的紫外吸收光谱图与标准纯试样的 紫外吸收光谱图，或与标准紫外吸收光谱图比较进行定 性。 ①当溶剂和试样浓度相同时，若两紫外吸收光谱图λmax 和εmax相同，表明它们是同一化合物。 ②具有不同或相同吸收基团的不同化合物，可能有相同 的λmax 值，此时，还应该比较其εmax。 例：见教科书196页 ⒉对比吸光度（或吸光吸数）的比值 不只一个吸收峰的化合物可用不同吸收峰处 (或谷)测得吸光度的比值作为鉴别的依据。 例:维生素B12的鉴别。中国药典规定在361nm 与278nm处吸光度的比值应为1.70～1.88； 361nm与550nm吸光度的比值为3.15 ～3.45。 ⒊对比吸收光谱的一致性 醋酸泼尼松 醋酸氢化可的松 醋酸可的松 λmax240nm,εmax1.57×104 杂质检查: ⒈如果化合物在紫外-可见区没有明显吸收，而所含杂质有 较强的吸收，则少量杂质就可用光谱检查出来。 ⒉若化合物有较强的吸收峰，而所含杂质在此波长处无吸 收或吸收很弱，杂质的存在将使化合物的吸收系数降低 ⒊若杂质在此吸收峰处有比化合物更强的吸收，则将使吸 光吸数增大，有吸收的杂质也将使化合物的吸收光谱变 形。 杂质的限量检测:见P197 第三节 紫外-可见分光光度分析方法二、定性分析 ㈠吸光系数法 根据朗伯—比耳定律: A = ? l C 若?已知，则可根据测得的A求出被测物的浓度。 第三节 紫外-可见分光光度分析方法三、单组分的定量分析 ㈡标准曲线法 AX CX C A 0 · · · · · A = ? l c ㈢对照法 同种物质、同台仪器及同一波长测定： 则： 例：见199页 截止波长：紫外吸收光谱溶剂允许使用的最大波长。 当紫外光波长大于截止波长时，该溶剂无吸收，不引起 干扰；反之会产生干扰。 在测定时应尽可能采用非极性溶剂； 在可见光测量范围内，可使用无色溶剂； 在300～400nm的紫外光区测量，溶剂要小于250nm； 在小于300nm测量时，可选用己烷、环己烷或庚烷等饱和 烃。 在测定紫外-可见光吸收光谱时,应标明使用的溶剂。 ⒈普通分光光度法 ⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波 长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 第三节 紫外-可见分光光度分析方法四、多组分的定量分析 ⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= ε