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半自动生化分析仪测试方法简介 生化分析仪的测量原理为朗伯 - 比尔定律。一束强度为 Io 的平行单色光照射到均匀、非散射的溶液时,设透射光的强度为 It ,定义 T = It/Io 为透过率,透过率的负对数定义为吸光度 A ,即 A = - lgT。则:A = KCL 式中, K为吸光系数, C 为溶液浓度,L 为液层厚度。 此关系式是各种吸收光谱仪器的理论基础;它表明:当液层厚度固定时,溶液的吸光度与其浓度成正比。只要测出某种溶液的吸光度,将它与已知浓度的标准溶液吸光度进行比较,就可以算出该溶液的浓度。 (1)吸光度法(ABS) :即直接测量样品的吸光度。样品吸光度为样品液和空白液透过率负对数值之差。即:ABS = A1 - A0 ;其中:A0 、A1 分别表示空白液和样品液的吸光度值。 (2)终点法(或称线性浓度法,CONC.L) :根据反应达到终点时反应物吸光度的大小计算样品浓度的方法。即样品浓度: C样品 = （A样品/A标准）*C标准 。其中C样品和C标准分别为样品和标准液的浓度;而 A样品和A标准分别为样品和标准液的吸光度。为计算方便,定义因数 F =C标准/A标准,则样品浓度为:C样品 = A样品* F。 (3)两点法(又称固定时间法,FIX. T) :根据 T1，T2两个时间点吸光度差与待测物浓度之间成正比关系计算样品浓度: C样品 = (ΔA样品/ΔA标准)*C标准。其中 C样品和 C标准分别为样品和标准液的浓度;而ΔA样品和 ΔA标准分别为样品和标准液在T1 、T2 两个时间点的吸光度变化值,即:ΔA标准 = (A1 - A2)标准 - (A1 - A2)空白，ΔA样品 = (A1 - A2 )样品 - (A1 - A2 )空白。式中的 A1 和A2 分别为各溶液在 T1 、T2 两个时间点的吸光度值。为计算方便,定义因数 F =C标准/ΔA标准,则样品浓度为C样品=ΔA样品*F (4)动力学法(又称连续检测法、速率法,KIN) :即连续检测反应过程,根据所测定的产物生成速度(吸光度曲线的斜率) 进行定量分析的方法。样品浓度: C样品 =((ΔA样品 -ΔA空白)/Δt)* F。其中: C样品为样品液的浓度,ΔA样品和ΔA空白分别为样品和空白液在Δt时间内的吸光度变化值, F为因数(试剂盒中有标示) 。 非线性浓度法(CONC.N) :用3～6 个已知浓度的标准液,测出其吸光度值,对应于其浓度值,采用内插法做出标准曲线。只要测出样品的吸光度值,便可以根据标准曲线采用内插法计算出样品的浓度值。 半??动生化分析仪技术参数 线性范围：0.000-3.000A 分辨率：0.001Abs（显示），0.0001ABS（内部计算） 漂移：0.003A/60min 光源：卤乌灯，6V/10W，寿命2000小时 半带宽：〈10nm 波长：340，405，500，546，578，620，670nm,可增配一个波长 比色池：石英流动比色池 进样量：200-3000ul(增量50ul) 温度控制：室温，25，30，37℃（Peltier元件），精度±0.1℃ 交叉污染：〈1% 存贮：160个测试项目 比色杯：12.5mm×12.5mm方形试管 打印：外接通用打印机 计算机：嵌入式高速处理器 接口：Rs232双向通讯口，PSTN接口（选购件） 重量：约10Kg 显示：7“彩色LCD显示器（640×240线），256色 电源：110VAC-250VAC±10%，50-60Hz 外形尺寸：450mm(L) ×330mm(W) ×140mm(H) 临床知识介绍 生化试剂——使溶液颜色发生变化的化学物质。 标准曲线（又称校正曲线） ——比色分析的标准曲线是在可测定的浓度范围内，配制数种不同浓度的标准液，经与被测液同样的处理后，以不同浓度的标准管所读取的光密度值在计算纸上以横轴为浓度，纵轴为光密度，通过的直线就为标准曲线。 空白概念 ——是比色分析方法中常用的概念，意即：在做样本测量前，由于试剂本身的颜色（有一定的吸光度），和试剂与血清反应后生成的颜色（有一定的吸光度），为了保证测量的准确性，先测出试剂本身的吸光度，然后在测样本的吸光度中减去试剂本身的吸光度，而试剂本身的吸光度即为空白。一般有颜色的试剂均要做空白。 多种曲线方程——测量时需要带多种“标准”的一种测量方法。标准指有定值的质控血清、质控液等。 质控液 ——用来监控本次测试测量数值是否有效的质控物。常在测试时与普通样本一样测试。 溶液浓度测量方法 C=F×A 终点法 C: 浓度 F：因数（系数） C=F×ΔA 两点法 A: 吸光度 Δ A： 吸光度变化量 C=F ×ΔA