分子生物学试验室初步建立-杭州第七人民医院.DOC

杭州市第七人民医院分子生物学实验室功能设置及检测项目介绍 一、分子生物学实验室功能设置 杭州市第七人民医院院分子生物学实验室于2013年年底投入使用，是我院完成各级项目课题的中心平台，为本院科研的开展提供硬件、人员和技术支持，同时开展了一些临床检验项目，为病人服务。 分子生物学实验室分为两个部分，即PCR实验室和基础实验室。 PCR实验室主要把PCR（聚合酶链反应）技术应用于精神疾病的研究、诊断与治疗监测，按照卫生部临床基因扩增实验室的标准设立，分为独立的4区（见下图），并配有生物安全柜、荧光定量PCR仪、梯度PCR仪、水平电泳系统、分子成像系统等仪器设备，满足核酸半定量、定量以及基因分型等项目的开展。 基础实验室开展除核酸扩增以外的其他实验，配置实验室常用仪器和设备，如纯水机、冰箱、水浴锅、摇床、离心机、垂直电泳系统等，完成蛋白质水平的定量或半定量检测，包括酶标仪测定的ELISA法和垂直电泳系统测定的Western-blot法。 基础实验室 　 二、分子生物学实验室临床项目开展情况 1.CYP2C19基因分型检测 临床意义：精神疾病的药物治疗效果以及不良反应因人而异，据现有的研究报道，药物代谢酶活性是影响疗效及其不良反应的重要因素。CYP2C19是药物代谢酶中的一种，精神科常用药物中丙戊酸盐、舍曲林、西酞普兰（艾思西酞普兰）、三环类抗抑郁药（如阿米替林、丙咪嗪、多虑平等）等均由该酶代谢。其基因型决定了该酶的活性大小，遗传学上，根据基因型将该酶的代谢速度分为快、中、慢三种代谢型。一般来说，对于代谢产物无治疗活性的药物，代谢速度快者，药物在体内半衰期短，药效相对差，需要适当加大用药剂量；而慢代谢者，药物在体内半衰期长，副反应相对严重，需要适当减少用药剂量。而对于代谢产物有治疗活性的药物，则相反。 在CYP2C19基因型与药物代谢速度 基因型 药物代谢速度 *1/*1（636GG，681GG） 快 *1/*2（636GG，681GA） 中 *1/*3（636GA，681GG） 中 *2/*2（636GG，681AA） 慢 *3/*3（636AA，681GG） 慢 *2/*3（636GA，681GA） 慢 本项目通过测定患者的基因型，从遗传学角度来判断被检者CYP2C19酶活性大小，并判断由该酶代谢的药物在体内的半衰期长短，从而预测或者评价被检者对以上精神科药物的疗效以及副反应大小。 2. 酒精代谢能力基因分型测定 临床意义： （1）正常健康人酒量鉴定：“感情深，一口闷”是中国的重要酒文化，可如果有人不胜酒力，却大量饮酒，对人体伤害极大，甚至会有生命危险。研究表明，人一出生基因即决定了酒量，基因“不对”，酒量永远练不大，这解释了为什么有的人天生就是“千杯不醉”，而有的人“一杯就倒”。本项目通过检测酒精在体内代谢时的关键酶乙醛脱氢酶的基因型，来判断一个人的酒精基因到底给不给力，该酶活性与饮酒建议见表２。 表2　乙醛脱氢酶基基因型与酶活性的关系 乙醛脱氢酶基因型 酶活性 酒精代谢能力 饮酒建议 Glu504Glu(*1/*1) 100% 好 可适量饮酒 Glu504Lys(*1/*2) 13% 差 要控制饮酒 Lys504Lys(*2/*2) 2% 很差 最好不喝酒 （2）饮酒与精神疾病的关系 ①饮酒与精神疾病发生与复发的关系：饮酒引起血脑屏障通透性增加，导致中枢神经系统广泛而严重的损害，造成酒精性精神疾病、酒依赖综合征等；另外，酒精对大脑卵磷脂亲和作用强，会加重精神疾病或者导致精神疾病复发。 ②饮酒与抗精神病药物疗效的关系：服用抗精神病药物的同事，如果大量饮酒与，酒精可干扰药物代谢酶活性以及阻碍药物与靶点的结合，从而影响药效或增加毒性，甚至危及人的生命。 如果一个人的乙醛脱氢酶活性越低，酒精在体内存留时间越长，对精神疾病发生、复发以及药物疗效和副反应影响越大。因此，建议有饮酒需求的精神疾病患者必做酒精代谢能力测定。 3.精神疾病易感基因测定 精神疾病的病因是复杂的，归纳起来说，它是遗传和环境因素共同作用的结果，本项目通过测定精神疾病易感性基因，判断患者发病是遗传因素占主导还是环境因素占主导，从而帮助临床医生选择合适的治疗方案。目前，本实验室即将开展抑郁症易感基因检测和阿尔茨海默病易感基因检测。 请大家多提宝贵意见和建议，您的意见和建议将有助于我们实验室的进步与发展。 PCR室I区：试剂准备区 PCR室II区：样本处理区 PCR室III区：PCR扩增区 PCR室IV区：产物分析区