刺参腐皮综合征颉颃菌的筛选及鉴定.pdfVIP

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　 　 　２０１６（０６上）：２８－３２，３６ 刺参“腐皮综合征”颉颃菌的 筛选及鉴定 杨亚楠，李雅华，闫欣欣，郭瑞峰，李　斐 （青岛农业大学 生命科学学院，山东 青岛２６６１０９） 中图分类号：Ｓ９４１．４２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４－７０３４（２０１６）０６－００２８－０６ 关键词：刺参；颉颃菌；腐皮综合征；筛选；鉴定 摘　要：为了防治刺参“腐皮综合征”，筛选微生物制剂菌株，试验采用对峙培养法以灿烂弧菌和假交 替单胞菌为指示菌，进行了颉颃微生物筛选，并用形态学结合 １６ＳｒＤＮＡ序列分析法进行菌株鉴定， 对优良颉颃菌进行了凝集试验和攻毒试验。结果表明：共分离筛选到１０株对２种病原菌具有较高颉 颃作用的细菌；经形态学鉴定和 １６ＳｒＤＮＡ序列同源性分析，９株为芽孢杆菌属，１株为节杆菌属；菌 ９ 株ＣＮ１０１、ＨＮ９６、ＳＹ３８和ＳＥ８８不产生溶血素，浓度为１×１０ｃｆｕ／ｍＬ以下时，对刺参幼苗安全；４株 菌在２０小时时对灿烂弧菌和假交替单胞菌的凝集率分别在７３．５０％和７０．４０％以上，自凝集能力均 在７６．２５％以上。对灿烂弧菌的抑菌圈直径在１１．５～２０．０ｍｍ之间，对假交替单胞菌的抑菌圈直径 在１０．０～１７．０ｍｍ之间。说明ＣＮ１０１、ＨＮ９６、ＳＹ３８和ＳＥ８８对２种病原菌均具有高颉颃性和凝集性， 并对刺参安全，可用于开发微生物制剂防治刺参“腐皮综合征”。 Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｆｏｒｓｋｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｓｙｎｄｒｏｍｅｉｎ Ａｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ ＹＡＮＧＹａｎａｎ，ＬＩＹａｈｕａ，ＹＡＮＸｉｎｘｉｎ，ＧＵＯＲｕｉｆｅｎｇ，ＬＩＦｅｉ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＱｉｎｇｄａｏＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６１０９，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓｊａｐｏｎｉｃｕｓ；ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｂａｃｔｅｒｉｕｍ；ｓｋｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｓｙｎｄｒｏｍｅ；ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ；ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｐｒｅｖｅｎｔａｎｄｔｒｅａｔｓｋｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｓｙｎｄｒｏｍｅｉｎＡｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓｊａｐｏｎｉｃａｓ，ａｎｄｓｃｒｅｅｎｔｈｅｓｔｒａｉｎｓｆｏｒｍｉｃｒｏｂｉａｌａｇｅｎｔｓ，ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｍｉ ｃｒｏｂｅｓｗｅｒｅｓｃｒｅｅｎｅｄｂｙｃｏｎｆｒｏｎｔａｔｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄｕｓｉｎｇＶｉｂｒｉｏｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓ（Ｖ．ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓ）ａｎｄＰｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｉｆａｃｉｅｎｓ（Ｐ．ｉｆａｃｉｅｎｓ）ａｓ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｂａｃｔｅｒｉａ．Ｔｈｅａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈ１６ＳｒＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎａｎｄ ｃｈａｌｌｅｎｇｅｔｅｓｔｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｆｏｒｅｘｃｅｌｌｅｎｔａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｔｏｔａｌｏｆ１０ｓｔｒａｉｎｓｗｉｔｈｈｉｇｈｅｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃｅｆｆｅｃｔａ ｇａｉｎｓｔＶ．ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓａｎｄＰ．ｉｆａｃｉｅｎｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｓｃｒｅｅｎｅｄ，ａｎｄｔｈｅｎｕｓｅｄｆｏｒｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆ１６Ｓ ｒＤＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅ，ｔｈｅｒｅｉｎｔｏ，９ｓｔｒａｉｎｓｂｅｌｏｎｇｅｄ