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Wee1蛋白激酶探究及进展[摘要] Wee1蛋白激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的一员，其主要通过抑制Cdc2的活性对细胞周期进行调控，进而抑制细胞进行有丝分裂。本文将对Wee1蛋白酶的作用机制、活性调节等内容进行阐述，并对研究前景进行展望。 [关键词] Wee1蛋白激酶；磷酸化；细胞周期调节；活性调节 [中图分类号] R34[文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2011）04（a）-０25－０2 Wee1蛋白激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的一员，最早由Nurse等人在裂殖酵母细胞（S.pombe）中分离出来。由于其可以通过抑制Cdc2的活性来抑制细胞进行有丝分裂，从而使得真核生物体积减小，因而被命名为“Wee”家族[1]。目前，人们对于Wee1蛋白激酶的研究已经不仅仅局限于最初的裂殖酵母，而是相应的扩展到鲫鱼、爪蟾、鼠等多种模式生物，且在人体内，也找到了Wee1的同源基因编码产物。在哺乳动物中，Wee1蛋白激酶家族包括Wee1A、Wee1B和Myt1三个成员，Wee1A在体细胞中表达，Wee1B在胚细胞中表达，Myt1在体细胞和胚细胞中都表达[2]。在人体中，Wee1是一个含有647个氨基酸，且在SDS中大小为94 KDa的蛋白质。在其他真核生物中，也可以找到与其功能类似的酶类，但分子大小、结构不尽相同。尽管研究的进程在逐步深入，但对于Wee1蛋白酶的研究，还是以裂殖酵母中最为透彻。 1 Wee1蛋白激酶的作用机制 总的来讲，Wee1的作用方式是通过磷酸化Cdc2的Tyr15和Thr14位点，使Cdc2的活性被抑制从而来抑制细胞的有丝分裂[3]。具体来讲，Wee1的作用机制有以下几个方面： 1.1 Wee1蛋白激酶对于G2/M检查点的作用 Wee1可以通过磷酸化Cdc2的Tyr15和Thr14位点，使Cdc2的活性被抑制来抑制细胞的有丝分裂。在裂殖酵母中，Wee1编码基因的缺失，可使细胞生长而不分裂。而当细胞顺利通过G2/M检查点时，Wee1的活性就会在多种调控因子的作用下减弱，使得Cdc2的活性大大增强，同时，Cdc2本身也可以通过磷酸化的方法使得Wee1的活性降低，从而形成正反馈环。然而细胞进入有丝分裂M期，不仅要依靠Wee1蛋白酶活性的降低，同时还需要细胞周期蛋白（cyclins）的生成和激活[4]。 1.2 Wee1蛋白激酶对于细胞体积检查点的作用 为了使细胞的体积控制在一定范围内，机体需要将细胞体积与细胞有丝分裂周期结合起来。在哺乳动物的体内，体积直径小于正常细胞80%的细胞便不可以进行有丝分裂，而这种机制也被形象的称为细胞体积检查点。对于体积过小的细胞，其中的MPF不能同正常细胞一样被激素激活，究其原因，很重要的一点就是在Wee1蛋白激酶的作用造成细胞中Cdc2的量不足[5]。 1.3 Wee1蛋白激酶对于DNA损伤检查点的作用 DNA损伤检查点的作用是使有DNA损伤的细胞延期进入有丝分裂期。而Wee1蛋白激酶也在DNA损伤检查点作用的过程中发挥着自己的作用。实验证明，在裂殖酵母中，用伽马射线诱变的种群因为Wee1蛋白激酶编码基因的缺失而无法使得G2期延长，以完成组织含有DNA损伤的细胞进入有丝分裂周期的作用[6]。 2 Wee1蛋白激酶活性的调节 特定位点的磷酸化及蛋白降解是Wee1蛋白激酶活性调节的两种方式。 2.1 Wee1蛋白激酶的特定位点的磷酸化 Katayama K等[7]人的实验证明，如果将642位的丝氨酸突变为丙氨酸（S642A），结果Wee1 S642A不能与14-3-3脚手架蛋白结合，说明14-3-3的结合需要Wee1 Ser642磷酸化，进而说明，在S期和G2期，Wee1蛋白激酶的磷酸化活性调节位点是位于近羧基端的642 位Ser残基（Ser642）。 在另外的实验中，Watanabe N等[8]人观察到，在M期，裂殖酵母的Wee1蛋白激酶的活性因氨基端非催化域被磷酸化而丧失。由于该过程的具体发生机制尚不明确，还不能断定哺乳动物中也存在相似调节过程。但通过他们的研究，也已证明，Cdc2/cyclinB, Plk1, PKB/Akt, PKA等多种蛋白参与Wee1蛋白激酶活性的调节。 有实验证明，在爪蟾体细胞中，Wee1蛋白激酶的 Thr 186（在鼠和人中为Thr 239）位点的磷酸化为Pin1（peptidyl-prolyl cis/trans isomerase）产生了一个结合位点；而这个结合是细胞进入M期使Wee1蛋白激酶失活所必需的因素[9]。 人类Wee1的Tyr 295和Tyr 362（相当于鼠的Tyr 294和Tyr 361）位点可发生自身磷酸化，但自身磷酸