反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌移植瘤治疗作用.doc

反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌移植瘤治疗作用基金项目开封市科技攻关项目(110336)? 摘要目的：观察反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌移植瘤的抑制效应。方法：将小鼠乳腺癌细胞4T1注射到Balb/c小鼠右腹部第二乳房脂肪垫下，1周后，分别用50mg/kg的反应停和25mg/kg的他莫昔芬单独及联合治疗荷瘤小鼠2周，每周2次测量各组小鼠肿瘤体积大小，观察小鼠的体重、摄食量、饮水量。治疗结束后次日，检测小鼠血清VEGF和TNF-α，切除肿瘤称重，并检测小鼠肺转移结节数。结果：反应停联合他莫昔芬能协同抑制小鼠移植瘤的生长，增加荷瘤小鼠摄食量及饮水量，阻止体重下降，降低血清VEGF和TNF-α，减少小鼠肺转移结节数。结论：反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌移植瘤有协同治疗作用，其机制可能与降低血清VEGF和TNF-α水平有关。? 关键词反应停他莫昔芬乳腺癌? doi:103969/jissn1007-614x201133005?? 他莫昔芬(Tamoxifen，TAM)是雌激素受体阳性乳腺癌内分泌治疗的首选药物，但许多乳腺癌患者特别是部分绝经期后的乳腺癌患者由于雌激素受体(ER)表达缺失对TAM不敏感??［1］?。反应停作为一种血管生成抑制剂，已经在治疗难治性多发性骨髓瘤方面取得良好的效果，新近有临床报道沙利度胺治疗晚期乳腺癌疗效显著??［2，3］?。因此，推测反应停联合他莫昔芬可能有协同治疗乳腺癌作用。为了验证这个假设，观察了反应停联合他莫昔芬对小鼠乳腺癌的治疗作用。? 资料与方法? 试剂：反应停片，用时0?5%的CMC-Na混悬成适当浓度。枸橼酸他莫昔芬片，用时0?5%的CMC-Na混悬成适当浓度。血管内皮生长因子VEGF和肿瘤坏死因子TNF-αELISA试剂盒。? 实验动物及瘤株：BALB/c小鼠，雌性，18～22g；4T1乳腺癌瘤株由中科院生物物理研究所梁伟教授惠赠，本实验室于BABL/c小鼠在体传代保存。? 主要仪器：酶标仪：Elx800型，BIO-TEK。? 实验方法：①对小鼠4T1乳腺癌自发肺转移的影响：取接种2周生长良好的小鼠4T1乳腺癌组织，用生理盐水研磨制备成5×10?6个细胞/ml悬液，以0?1ml/只接种于40只雌性BALB/c小鼠的第二乳房脂肪垫下。接种后1周将小鼠按体重分为4组，每组10只，即模型对照组：每天2次灌胃生理盐水；反应停组：每天灌胃反应停50mg/kg体重，2次；他莫昔芬组：每天灌胃他莫昔芬25mg/kg体重，2次；联合治疗组：每天灌胃反应停50mg/kg+他莫昔芬25mg/kg体重，2次。每天上午9：00和下午5：00给药，各组灌胃容积均为0?2ml/10g体重，连续给药2周。治疗后用游标卡尺每周测肿瘤直径2次，按公式计算肿瘤体积，肿瘤体积(mm?3)=(肿瘤长度×肿瘤宽度×肿瘤厚度)，并每周监测小鼠体重、摄食量、饮水量变化判断药物治疗相关毒性。全程治疗结束第2天每组取小鼠采血，处死剥瘤称重，并用10倍放大镜检测肺部各叶肿瘤转移结节数。用ELISA试剂盒测定血清血管内皮生长因子VEGF和肿瘤坏死因子TNF-α。? 表1反应停联合他莫昔芬对小鼠4T1乳腺癌的治疗作用(?n?=10，?X±S?)? 组别剂量?(mg/kg) 原位肿瘤 重量(g)抑制率(%) 肺转移结节 数目(个)抑制率(%) 对照-246±051-283±64- 他莫昔芬50208±048???154276±7125 反应停10023868?314 他莫昔芬/反应停50/100117±051???626102±36???640 [BG）F][CSX%0，0，0，40]注：与对照组比较：??P?＜005，????P?＜001。[FK）]? [CSX] 表2反应停联合他莫昔芬对4T1乳腺癌荷瘤小鼠动态指标的影响(?n?=10，?X±S?)? 指标对照他莫昔芬反应停他莫昔芬/反应停 肿瘤体积8天584±103602±108575±114591±115 (mm?3)11天1681±1541165±163?1491±1621014±192? 15天7242±5174813±637???6843±6273645±527??? 18天15263±138510485±1534???14558743??? 22天28415±322417541±2826???27684±331510354±2136??? 体重(g)8天195±14196±15194±14193±15 11天206±15188±20208±20198±16