细胞培养第二版知识点总结.docVIP

：细胞组织培养的三种类型？ 原代外植块培养：是从人或动物体内取出一小块组织，模拟体内生理环境，在保证无菌、适宜温度和营养条件下，使之生存和生长并保持其结构和功能的方法。 器官培养：指的是应用和组织培养相似的条件，培养的是器官的原基或器官的一部分或整个器官，使之在体外生存、生长和保持一定功能的方法。 细胞培养：是以相似的培养方法体外培养单个细胞或单一细胞群，使其在适宜条件下生长并保持细胞特性。 第二章 体内体外的环境不一样，细胞之间的粘附是通过什么实现的？ 细胞的黏附是通过特异的细胞表面受体与细胞外基质分子结合实现的。 在细胞铺展之前，细胞已分泌了细胞外基质蛋白和蛋白聚糖。细胞外基质先黏着到带电底面上，然后再通过特异的受体附着到基质上。 因此，细胞曾经生长过的玻璃或塑料表面更适合细胞附着，用基质成分，如纤连蛋白、胶原或其衍生物（如明胶）预处理培养器皿，有利于要求复杂培养条件的细胞附着和增殖。 主要有四类跨膜蛋白参与了细胞与细胞、细胞与底物的黏附。 不依赖Ca2+的细胞间黏附分子 介导同种或异种细胞与细胞粘附 依赖Ca2+的钙黏着蛋白 参与同源细胞间的相互作用 整合蛋白，介导细胞与基质之间的相互作用，是基质分子 跨膜的蛋白聚糖，能和基质成分如其他蛋白聚糖或胶原相互作用，具有稳定、活化和把生长因子转运到高亲和性受体上的作用。 细胞外基质成分及作用？ 细胞外基质（ECM）由胶原、层粘连蛋白、纤粘连蛋白、透明质酸酶、蛋白多糖及膜结合生长因子（或细胞因子）等各种成分组成。 ECM能提高细胞的生存、增殖和分化能力 概念，接触抑制：细胞在生长过程中达到相互接触时运动停止，同时细胞质膜褶皱减少，最终细胞分裂停止。 诱导细胞分化的条件？ 有助于诱导细胞分化的条件： 细胞密度高 细胞与细胞、细胞与基质之间作用强 培养基中存在各种分化因子 细胞信号传递的类型？ 体内细胞的增殖、迁移、分化、凋亡均受细胞间、细胞与基质间相互作用及营养条件和激素等信号分子的调控。 体内细胞信号传递的类型有： 自分泌：由细胞自身合成并通过与自身受体结合作用于细胞自身。 内分泌：信号分子通过体内脉管系统从一种细胞转移到另一种组织细胞中发挥作用的过程 同型（旁）分泌：某些细胞分泌的可溶性信号物质作用于同类型细胞。 异型旁分泌：同一细胞类型分泌的信号物质作用于不同的反应蛋白 旁分泌：不通过血液而直接作用于邻近细胞的方式 体内都存在这些类型的细胞信号传递方式，而在体外，在具有基本培养基的常规条件下，只有自分泌和同型分泌两种方式。 细胞传代分为哪三个阶段？ 原代培养期：从体内取出组织，接种培养到第一次传代阶段（初代培养） 1-4周、细胞呈活跃的移动、可见细胞分裂、形态结构和功能活动上与体内原组织相似性大、多呈二倍体核型 细胞群是异质的，细胞克隆形成率很低，即细胞独立生存性差。 传代期：初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系。为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期或传代后早期冻存（10代内）。一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期，即有限细胞系 。 衰退期：此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖，细胞很难长满培养空间； 细胞形态轮廓增强，色泽变暗，胞质内出现暗的颗粒样结构以及空泡状结构，胞质突起回缩，突起边缘有时可脱落； 最后衰退凋亡。 ： 1.血清的主要作用有哪些？ 血清是最常用的天然培养基，含有丰富的营养物质，包括大分子蛋白质和核酸等，对促进细胞生长繁殖、黏附及中和某些物质的毒性有一定作用。 提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。 提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。 提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。 提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。 对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。使用血清可终止胰蛋白酶的消化作用。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，在代谢解毒中起重要作用。 第五章 1.概念，原代培养：指细胞分离之后至第一次传代之前的细胞培养阶段 2.体外细胞培养的类型？ 体外培养细胞大多培养在瓶皿等容器中，根据它们是否能贴附在支持