直肠癌中MMP-7及MVD表达及其及肿瘤转移及预后相关性探究.docVIP

直肠癌中MMP-7及MVD表达及其及肿瘤转移及预后相关性探究[摘要] 目的：探索基质溶解素（MMP-7）、微血管密度（MVD）与直肠癌临床病理的关系及其在肿瘤浸润转移中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测42例直肠癌组织及18例正常直肠组织（对照组）中MMP-7和MVD的表达情况。结果：直肠癌及对照组中CD34的表达分别为（43.50±11.80）及（23.83±4.88），两组比较，有非常显著性差异（P 1.2 方法 全部标本均经40 g/L甲醛溶液固定，石蜡包埋组织，切片；常规脱蜡至水，3% H2O2去离子水孵育10 min，以消除内源性过氧化物酶；PBS冲洗，滴加血清工作液，室温孵育15 min（非特异性抗原封闭）；滴加一抗，4℃冰箱过夜。同时用已知的乳腺癌MMP-7阳性组织作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。PBS洗3次，滴加二抗，室温30 min，PBS洗3次，DAB显色，蒸馏水终止，苏木素复染，脱水和透明，封固阳性信号在细胞质呈棕褐色颗粒状均匀分布。 1.3 结果判定 MMP-7判定标准：光镜下观片，在高倍镜视野（×400）下计数，按其阳性细胞分布范围判定，阳性细胞少于切片中肿瘤细胞的25%者判定为（-）；26%~50%记为（+）；51%~75%记为（++）；≥76%记为（+++）。MVD（用CD34进行标记）判断标准：采用Weidner[2]的评判标准，计算直肠癌间质内着色的毛细血管和微小血管。计算方法：每张染色切片选择5个血管最多的癌间质区，在100倍视野下进行血管计数，每例标本计数5个视野，取其平均值。 1.4 统计学处理 用SPSS 15.0统计软件对MVD的表达进行成组资料t检验、MMP-7的表达进行?字2检验及生存率比较进行时序检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。 2 结果 2.1 MMP-7和MVD在直肠癌组织和正常直肠组织中的表达 MMP-7在直肠癌中的表达位于癌细胞的胞质，呈棕褐色、颗粒状。阳性细胞在癌巢中分布不均匀，常位于癌巢周边区域；在对照组组织的表达位于间质血管内皮细胞、成纤维细胞及巨噬细胞胞质内，MMP-7在直肠癌及对照组的阳性表达率分别为76.2%（32/42）及33.3%（6/18），两组比较，有非常显著性差异（P0.05），分化程度对于MMP-7阳性表达的差异也没有统计学意义（P0.05）；但有淋巴结转移的直肠癌患者的MVD阳性表达高于无淋巴结转移组（P0.05），分化程度对于MMP-7阳性表达的差异也没有统计学意义（P0.05），证实MMP-7与直肠癌的侵袭关联性不大。本实验结果与有关研究[4-5]的结果有所不同，造成此差别的原因可能是所选取的样本量有所不同，以及种族差异、地方差异等，说明MMP-7在直肠癌的发展、浸润和转移过程中可能发挥了一定的作用，但不是决定或重要作用。 3.2 MVD与直肠癌侵袭转移的关系 本实验中，直肠癌中的MVD值明显高于正常组织；淋巴结转移阳性组中的MVD表达率远高于淋巴结转移阴性组；同时分化较低的黏液癌和未分化癌组MVD值较分化较高的乳头状腺癌和管状腺癌组表达明显高，两组比较，有显著性差异（P 总之，直肠癌MMP-7、MVD均呈高表达，二者可能具有相互促进作用，即MMP-7能促进直肠癌血管生成，从而使血行转移速度加快；MMP-7、MVD将有可能成为临床新指标检测直肠癌高危人群，提示高表达MVD可能预示着直肠癌患者预后不良。 [参考文献] [1]万远廉,潘义生,郭源,等.人大肠癌中基质金属蛋白酶-7mRNA的表达[J].北京大学学报:医学版,2001,33(1):13-16. [2]Weidner N. Intratumormicrovessel density as a prognostic factor in cancer [J]. Am J Patho,1995,147(1):9-19. [3]Itoh Y, Nagase H.Matrix metalloproteinaese in cancer [J].Essays Biochem,2002,38(1):21236. [4]Liu XP, Kawauchi S, Oga A, et al. Prognostic significance of matrix metalloproteinase-7(MMP-7) expression at the invasive front in gastric carcinoma [J]. J Cancer Res,2002,93(3):291-295. [5]Hashimoto G, Inoki I, Fuj