MPN法检测结果的不确定度及其评定.pptVIP

测量不确定度评定示例四（ MPN法不确定度评定） 一、测定方法 MPN法:最（大）可能数,应用概率理论来估算细菌浓度的方法 应用现状 食品：大肠菌群、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌的 定量检测 生活饮用水：总大肠菌群、耐热大肠菌群和大肠埃 希氏菌的定量检测 粪便无害化：粪大肠菌值 质检、农业、环保等部门的标准方法 二、MPN法（大肠菌群MPN计数法） 检测过程—流程图 样品受理→取样→稀释→均质/混匀→加样→ ↑__________↓ 混匀 →加样→混匀→培养→观察→转种→培养→观察→确认阳性管→查MPN检索表并计算→报告 三、建立数学模型 Y= C1/C2×MPN ………………………（1） Y为样品的大肠菌群含量，其单位为MPN/g(mL)； C1 即国家标准检验方法中MPN检索表的样品加入量： 3×0.1g(mL)+3×0.01g(mL)+3×0.001g(mL) C1=0.333g(mL) C2为检测时的样品加入量,通常为： 3×1g(mL)+3×0.1g(mL)+3×0.01g C2(mL)=3.33g(mL) Y= 0.333/C2×MPN ………………………（2） 四、不确定度的来源分析 1.MPN检索表中每个MPN值本身的不确定度分量 2.C2的不确定度分量 加样仪器（10 mL和1 mL）的不确定度 3.其他未能呈现在公式中的不确定度分量 …样品的不确定度 …称量25g（mL）样品的仪器的不确定度 …连续两次（10倍和100倍）稀释引起的不确定度 …均质/混匀引起的不确定度 …培养引起的不确定度 …结果观察产生的不确定度 五、不确定度分量的量化 1.MPN值本身的不确定度 MPN检索表在每个MPN值后附带的该MPN值95%可信限的下限值和上限值 95%的可信限=±1.96σ（σ为标准偏差或标准不确定度） 扩展不确定度=k·标准不确定度(包含因子k通常取值为2) MPN值的95%可信限（上、下限值）就是该MPN值的扩展不确定度（范围值）（k=1.96） 例: 样品加入量3.33g（3×1g+3×0.1g+3×0.01g），确认的大肠菌群阳性管组合为3-2-1，则查得其MPN值为150,该MPN值对应的95%可信限的下限值和上限值分别为37和420。 注：相关数据来源于GB 4789.3-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 UL(下限值)=0.333/C2×MPN的95%可信限的下限值 =0.333/3.33×37=3.7 UU(上限值)=0.333/C2×MPN的95%可信限的上限值 =0.333/3.33×420=42 Y=0.333/C2×MPN =0.333/3.333×150=15 2.C2的不确定度分量 由C2贡献的不确定度分量主要来源于加样仪器（10 mL和1 mL）的不确定度，可按B类评定方法评定，根据以往的评定情况，均比MPN本身的不确定度小很多（小于最大分量的不确定度的1/3），均可忽略不计 3.其他未能呈现在公式中的不确定度分量 样品的不确定度 称量25g（mL）样品的仪器的不确定度 连续两次（10倍和100倍）稀释引起的不确定度 均质/混匀引起的不确定度 培养引起的不确定度 结果观察产生的不确定度 均可用A类评定的方法，只要操作人员的操作规范，根据以往的评定情况，均比MPN本身的不确定度小很多，均可忽略不计。 六、检测结果的扩展不确定度 U=kuc=2uc MPN值95%的可信限=±1.96σ（标准偏差或标准不确定度） 忽略C2和其它因素引起的不确定度 MPN值的95%可信限可表达为MPN法检测结果的扩展不确定度 七、检测结果报告 样品的MPN法检测结果为15 MPN/g，其报告方式为 大肠菌群（MPN/g）： 15，UL(下限值)=3.7，UU(上限值)=42；K=2 * *