碩士專業學位論文-蘇州大學學位論文數據庫.pdf

硕士专业学位论文 论文题目 植物固醇血症相关基因在白血病细胞株中的 表达及其临床意义 研 究 生 姓 名 程礼敏 指导教师姓名 王兆钺（教授） 专 业 名 称 内科学（血液病学） 研 究 方 向 出血性疾病的基础与临床 论文提交日期 2013 年4 月 This is trial version This is trial version 植物固醇血症相关基因在白血病细胞株中的表达及其临床意义 中文摘要 植物固醇血症相关基因在白血病细胞株中的 表达及其临床意义 中文摘要 植物固醇血症（sitosterolemia ），也称为β-谷固醇血症，是一种罕见的常染色体隐 性遗传性脂质代谢性疾病，1974年由Bhahacharyya首次报道，至今全世界共报道约100 例左右。其特征是过多的植物固醇在血液和组织中聚集，患者通常表现为腱性或结节 性黄褐瘤、早发型冠心病、动脉粥样硬化和关节炎等，少数患者还表现为溶血性贫血、 巨大血小板减少和脾脏肿大。1998年Patel实验室和Berge等确定了该病的发病基础是 位于染色体2p21上的ABCG5和ABCG8 。这两个基因所编码的蛋白Sterolin-1 （ABCG5 ） 和 Sterolin-2 (ABCG8) 属于三磷酸腺苷结合盒超家族G亚家族的成员，主要定位于肠 上皮细胞的顶膜及肝脏胆道的小管膜，在体内发挥调节固醇的吸收和代谢的功能。 ABCG5和ABCG8两者之一发生纯合或双重杂合突变均可导致体内植物固醇代谢发生 障碍，血浆和组织中植物固醇含量显著升高，从而引起一系列临床症状。到目前为止， 国际上报道的突变类型有错义、无义、缺失等40 多种，且ABCG8上发现的突变比 ABCG5 多。既往文献报道这对基因在近端小肠上皮细胞及肝脏中高表达，而在血细 胞中的表达至今尚无报道，认为血液系统方面的临床表现并非基因突变直接导致，而 是基因突变后引起血浆和组织中植物固醇含量显著升高，继而引起血浆渗透压变化所 致。本实验通过实时荧光定量PCR 、Western blot方法，分别在mRNA及蛋白水平证明 了这对基因在白血病细胞株中有表达。进而推测植物固醇血症患者血液学的临床表现 不仅仅是单纯的物理作用，还存在基因方面的调控。至于二者的作用机制以及相互关 系还有待于进一步探讨。 目的：研究植物固醇血症相关基因ABCG5和ABCG8在白血病细胞株中的表达， 并探讨其临床意义。 方法：应用实时荧光定量PCR技术检测ABCG5和ABCG8 mRNA在白血病细胞株 中的表达；应用Western blot 技术检测ABCG5 和ABCG8 表达蛋白（Sterolin-1 和 I This is trial version 中文摘要 植物固醇血症相关基因在白血病细胞株中的表达及其临床意义 Sterolin-2）在白血病细胞株中的表达。 结果：用实时荧光定量PCR 、Western blot技术分别在mRNA及蛋白水平证实 ABCG5和ABCG8在白血病细胞株中均有表达。 结论： 1、首次证明植物固醇血症相关基因ABCG5 和ABCG8 在白血病细胞株中有表达； 2 、提出植物固醇血症患者血细胞的改变是基因突变与血浆中高植物固醇共同作 用的结果； 3、为植物固醇血症的血液系统改变提供了实验依据，在临床诊断与治疗上有应 用前景。 关键词：植物固醇血症；ABCG5 ；ABCG8 ；Western-blot ；