两种海洋来源的吲哚咔唑类化合物抗肿瘤作用的早期成药性的分析研究.pdfVIP

两种海洋来源的吲哚咔唑类化合物 抗肿瘤作用的早期成药性研究 摘要 蛋白激酶C(PKC)是动物细胞内一类结构相似、功能不同的丝氨酸／苏氨 酸激酶，作为信号分子，PKC家族在介导肿瘤细胞增殖、分化、凋亡及血管生 成的信号通路中发挥至关重要的作用，PKC已经成为抗肿瘤治疗的一个靶点。 目前已开发了多种PKC抑制剂，其中已有一些抑制剂进入临床抗肿瘤研究， 体内药效仍不十分理想，靶点专一性较差，毒副作用较强，易产生耐药性等，针 对PKC靶点寻找高效低毒的抗肿瘤药物仍然具有现实意义与挑战性。 实验室前期研究中发现，吲哚咔唑类化合物MDZ．03在分子及细胞水平靶向 抑制PKCpn，体内表现出一定的抗肿瘤药效；双吲哚马来酰亚胺类化合物 ZWMl27在体外PKC[3II抑制剂筛选模型表现出较好的活性，且水溶性较好。本 进行了早期成药性评价。 第一部分：MDZ-03抗肿瘤作用的早期成药性研究 本部分实验主要对MDZ．03抗肿瘤作用的早期成药性进行了评价，具体包 括MDZ．03体内抗肿瘤药效评价以及MDZ．03早期的安全性评价、药代动力学 研究及早期吸收评价。 (1)在小鼠H22肝癌模型及人肺腺癌A549裸鼠移植瘤模型上，MDZ一03 腹腔注射给药，一天两次，MDZ．03表现出显著的抗肿瘤药效，但是依然存在溶 解性差的问题，高剂量组(20mg／kg)小鼠腹腔内有药物析出，体重明显下降。 微核实验结果显示，MDZ．03各剂量组的微核率与溶剂组相比较，无显著性差异， 表明MDZ一03无明显的致突变作用。 方法，方法学验证结果显示该检测方法色谱分离选择性好，回收率高，精密度、 灵敏度和定量线性范围均达到了体内药物分析的要求。绘制荷瘤小鼠(H22)单 MDZ一03后的药代动力学曲线，3P97软件拟合获得药代 剂量腹腔注射30mg／kg 动力学参数，小鼠体内MDZ一03呈二室模型代谢，具体参数如下：tmp(min)：147．3； T 456．66。 (4)MDZ．03体外小鼠肝微粒体孵育实验结果显示，与溶剂对照相比较， MDZ一03孵育组出现保留时间在9．64min的代谢产物峰，该色谱峰最大吸收波长 与MDZ一03接近，可能为其体外孵育后生成的结构类似物，体系中仍以MDZ-03 原型药物为主。 (5)建立CaCo．2细胞单层模型，考察对MDZ．03的吸收潜性，结果显示 适合口服给药。 第二部分：ZWMl27的体内外抗肿瘤作用评价 本部分实验体外考察ZWMl27的抗肿瘤作用，并对其作用机制进行了初步 探讨，并进一步体内评价ZWMl27的抗肿瘤药效。 (1)MTT法考察对多种细胞株的增殖抑制作用，发现ZWMl27在体外对 肿瘤细胞株有选择性增殖抑制作用，对人慢性白血病细胞K562及人非小细胞肺 癌A549作用显著。 特异性阻滞在G2一M期。 通过激活线粒体途径诱导K562细胞及A549细胞凋亡。 (4)体外分子水平上ZWMl27对PKC各亚型有一定的抑制作用，其中对 PKC0作用显著。 (5)ZWMl27可抑制NF．Kb信号通路。 1 (6)ZWM 裸鼠移植瘤并未表现出明显的抗肿瘤药效，原因是ZWMl27在血浆中无法稳定 存在，可能在体内迅速转变为无活性产物。 关键词：肿瘤、PKC、早期成药性 From The ofTwoIndolocarbazoles EarlyDrugabilityStudy AnticancerEffects OceanOH Proteinkinase aclassof similarand distinct C(PKC)isstructurally functionally kinasesinanimal hasacentralroleincellular serine／threonine cells，which