对氯苯肼分析.docVIP

4-氯苯肼盐酸盐 1 范围： 本标准适合对氯苯肼盐酸盐； 结构式： 分子式：C6H8Cl2N2 分子量：179.05 2 规格: 对氯苯肼盐酸盐产品应符合要求 指标 外观 鉴别HPLC 与标样一致 含量 95% 干燥失重 2% 相关物质（HPLC） 3-氯苯肼盐酸盐 ≤0.1% 2-氯苯肼盐酸盐 ≤0.1% 4-氯苯胺盐酸盐 ≤0.2% 其他杂质 ≤0.2% 总杂 ≤1% 3 4-氯苯肼盐酸盐分析方法： 3.1 鉴别： 用HPLC时，样品的保留时间和标准。 3.2 干燥失重： 1g产品在105℃的温度4小时 3.3 含量 使用试剂： 无水甲醇； 0.1N氢氧化钠溶液； 测定步骤： 称取200mg样品，用50ml无水甲醇溶解，用0.1N氢氧化钠溶液标定至终点；并进行空白滴定。 样品的测定表示为4-氯苯肼盐酸盐（%w/w） 其计算公式为： 其中： Vs=用于样品标定的氢氧化钠的体积 Vb=用于空白标定的氢氧化钠体积 W=样品重量 1790.5=产品分子量（=179.05）*滴定剂的当量浓度（=0.1N）*100 3.4 4-氯苯肼盐酸盐相关物质的检测 3.4.1 色谱柱： 3.4.2 柱温： 40℃ 3.4.3 流动相： 缓冲液：用500ml水溶解1.36g磷酸二氢钾，再用磷酸调节PH值到3.1； 缓冲液/甲醇=500/500 v/v 3.4.4 流速： 1.3ml/min 3.4.5进样量： 0μl 3.4.6检测波长： 210nm 3.4.7检测时间： 4-氯苯肼盐酸盐保留时间的10倍 3.4.8μg/ml); (b)：在100ml容量瓶中,加入50mg盐酸苯肼、10mg 3-氯苯肼盐酸盐和2-氯苯肼盐酸盐，用流动相稀释至刻度；再取0.5ml上述溶液，用流动相稀释至50ml; (c)：取20mg 4-氯苯肼盐酸盐标样至20ml容量瓶中，用（b）稀释至刻度（浓度：1.0mg/ml）； 系统适用性μl溶液 注射次数 (c) 1 空白 1 （b） 1 样品溶液 1 （a） 1 当色谱仪注入（c）时，色谱仪系统可用来分析的h/v值不大于2.0。（h是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到基线的距离，v是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到3-氯苯肼盐酸盐和4-氯苯肼盐酸盐之间峰谷的距离） 洗脱顺序是： RRT 盐酸苯肼 ~0.73 4-氯苯肼盐酸盐 1.00 3-氯苯肼盐酸盐 ~1.06 2-氯苯肼盐酸盐 ~1.13 4-氯苯胺盐酸盐 ~1.61 计算： 样品中已知杂质的含量（w/w%），用以下公式计算： 其中： As=样品溶液中杂质顶峰区域 Ar=（b）中杂质顶峰区域 Wr=杂质标准重量 Ws=样品重量 样品中其他杂质的含量（w/w%），用以下公式计算： As=样品溶液中杂质顶峰区域 Ad=(a)溶液中4-氯苯肼盐酸盐顶峰区域