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一篇关于食管角化干细胞的文献，难得有这么一篇，翻译出来与大家共享。原文：Okumura T, Shimada Y, Imamura M, et al. Neurotrophin receptor p75NTR characterizes human esophageal keratinocyte stem cells in vitro. Oncogene. 2003 Jun 26;22(26):4017-26.该文主要报道了食管keratinocyte (角化细胞或角质形成细胞) 干细胞可以被识别，识别的途径是通过低亲和力神经营养蛋白（neurotrophin）受体p75NTR以及差异表达的细胞黏附分子integrin（整联蛋白）β1和β4。来自于角化细胞的候选干细胞只是一小的细胞群，可以通过免疫细胞化学细胞分类法来分类，主要是基于上述细胞表面分子的不同表达水平来筛选分类。流式细胞分析揭示出这一小的细胞群在体外保留着相对慢循环（slow－cycling）表型。这些细胞表达低水平的胞外蛋白（involucrin）和细胞角蛋白13（cytokeratin13），提示相对于其他的合并表达更高水平的β1 整联蛋白的占优势的细胞群来讲，p75NTR阳性细胞群是不成熟的。p75NTR阳性细胞群对角化细胞在体外获得“不死性”甚为关键，同时该细胞群在包含有所有可区分的细胞亚群的角化细胞中占有最大的量。这个过程与p75NTR阳性细胞群的自我更新（self－renewal）和自我倍增密切相关。这些发现均提示p75NTR可作为一个干细胞的标记物，在研究与干细胞密切相关的生物学调节活动中很有应用价值，包括在再生上皮的肿瘤转化方面的研究。介绍部分：在体内正常的再生上皮里干细胞已经被作为一小群静息（quiescent）的或者是慢循环的细胞群而辨识。细胞黏附分子如β1、β4、α6 integrins等可以区分角化细胞，但单纯依赖细胞黏附分子来纯化干细胞候选群是不足够的，因为几乎所有的基底角化细胞都表达这些黏附分子，虽然表达强度不同，这些黏附分子对许多不同的生物学过程来说是必须的。Kaul和其同事已经识别和丰富了来自于表皮的假定的干细胞。通过FACS（fluorescence－activated cell sorting流式细胞术）方法分类，带有α6 integrinsbright/10G7dim标记的细胞被发现是由一小群（大概占基底细胞的10％）相对安静的细胞组成。这种分离的干细胞候选群体外长期培养有广泛的全增殖量，提示其体外的再生潜能（Li et al., 1998; Kaul and Li, 2000）。该文研究者在既往研究的基础上根据假定的干细胞标记p75NTR以及β1和β4 integrin（整联蛋白）来识别和分离食管角化细胞干细胞。研究发现纯化的p75NTR阳性细胞拥有几种自我更新干细胞才有的表型。特别地，它们在体外大量增殖，再造可区分的角化细胞亚群并且保留着慢循环和相对不成熟的细胞表型。最明显的，p75NTR阳性细胞的数量增加了好几倍伴随着细胞尺寸的增加，提示这些细胞在特定的培养状况下可以自我倍增。结果部分：⑴ p75NTR可从人的食管复层鳞状上皮中区分一小群角化细胞根据p75NTR、β1和β4 integrin（整联蛋白）的不同表达水平，人的食管上皮培养角化细胞可分为：（a）一小群（约占3－5％）共同表达p75NTR和相对低水平β1 integrin（整联蛋白）（p75NTR＋/Int. β1＋/Int. β4－）；（b）（p75NTR＋/Int. β1＋＋/Int. β4＋）（约占3－5％）；（c）（p75NTR－/Int. β1＋＋/Int. β4＋）（约占～10％）；（d）（p75NTR－/Int. β1＋＋/Int. β4－）（约占30－40％）；（e）（p75NTR－/Int. β1+/Int. β4－）（约占30－40％）；（f）（p75NTR－/Int. β1－/Int. β4－）（约占2－10％）。p75NTR阳性细胞（a＋b）与占主要部分的β1 integrin（整联蛋白）阳性细胞（c＋d＋e）可以通过应用抗p75NTR结合的磁珠（anti-p75NTR-conjugated magnetic beads）来分离。Western blot 和RT-PCR均证实了p75NTR在纯化的细胞群里在蛋白和mRNA水平上的表达。根据细胞对Ⅳ型胶原不同的亲和力，可以将p75NTR阴性细胞再分为β1 integrinbright和β1 integrindim细胞群。与结合慢的细胞群相比，快速结合到Ⅳ型胶原上的角化细胞群被证实是由含有更高水平的β1 integrin的细胞组成。这里将p75NTR阳性细胞（a＋b）、p75NTR－/Int.