酶标仪使用详解.ppt

酶标仪使用详解 工作原理 酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长，在此波长下，此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段，就会造成检测结果的不准确。因此，在测定检测物时，我们选择特定的波长进行检测，称为测量波长。注意这里提出了两个关键概念OD值（吸光值）和波长。 常用酶标仪 雷勃-MK3 常用酶标仪 科华ST-360 酶标板 96孔透明酶标板 酶标仪基础设置 增加酶标仪仪器 设置内容 仪器类别 必须选择“酶标仪” 酶标仪设置 波长 振板频率 振板时间 进板方式 空白形式 酶标仪项目设置 项目设置 项目性质 必须选择”酶标仪目” 阳性公式 阳性公式: OD=NC*2.5 弱阳性公式 阳性公式: OD= NC*2.1 CutOff公式 NC*2.1 控制界面 酶标板 酶标板 组成 酶标板是由12*8个孔组成的，每一个孔可以理解为一个标本。每一板中还需要设置和阳性公式相关的孔阳性、阴性、空白等。 酶标项目 每一行可以设置一个酶标项目（下拉方式），可以设置为单板单项和单板多项。 酶标板 每一个孔代表可以设置的含意 普通(纯数字) = 标本号 空白孔=(BC+N) 阴性孔=(NC+N) 阳性孔=(PC+N) 质控孔=(QC+N) 酶标板 空白对照=(BC1+BC2+BC3…)/N 阴性对照=(NC1+NC2+NC3…)/N 阳性对照=(PC1+PC2+PC3…)/N Cutoff=Cutoff公值的计算值 酶标板 模板 可以把当前设置好的酶标板保存为模板，供以后使用。 标本号设置 可以使用拖动的方式增加标本号，标本号生成可以分为横行和纵向。 酶标板 酶标板的显示内容 样本编号=标本号 原始OD值=仪器传回来没有减去空白的OD值（OD值=吸光度值） OD值=根据参数来判断是否要减去空白孔的值（BC）。 定性值=根据公式计算出孔是阴性、阳性、弱阳性 双波长测量介绍 使用参考波长过滤一些环境因素（样本的浊度、干扰色、噪音、漂移、电压）,使结果更稳定。 使用双波长测量是不需要设置空白孔的。 对一些比较敏感的项目最好使用双波长如HIV。 双波长测量 只需要设置了参考波长程序就认为当前要使用双波长进行测量。 难点： 怎样确认当前波片的波长。 酶标板项目设置 单板单项 一个酶标标只有一个项目，常用于标本量比较大的时候。 单板多项 一块板可以做多个项目，注意项目是横向排列的而且每个项目都必须设置公式中需要的阴性阳性孔。 工作流程 练习 按要求建立酶标项目。（见练习文档提纲十）