乳糖诱导大肠杆菌中重组谷氨酰胺合成酶的表达-南京师范大学学报.PDF

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乳糖诱导大肠杆菌中重组谷氨酰胺合成酶的表达-南京师范大学学报

第 卷第 期 南京师大学报(自然科学版) aI,# LI# ( ( ( %%: 年 月 []N^LC) ]_ LCL[EL+ L]^‘C) NLEa8^4E@b(L/.-M/, 4D132D3 ) 43? ,%%: 乳糖诱导大肠杆菌中重组谷氨酰胺合成酶的表达 !, 刘俊红 ,刘顺谊 ,殷志敏 (!# 安徽师范大学生命科学学院,安徽 芜湖$ !%%% ) ( # 南京师范大学生命科学学院,江苏 南京!%%’ ) [摘要]( 以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶()*谷氨酸:氨连接酶,+,-./0123 452.63./73 ,+4 89 :; ; !; )蛋 白表达宿主菌株=)!(8 )(?8@9A 谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助44*BC+8 分析方法,对于用乳糖 诱导由@’,/D 启动子控制的重组目的产物蛋白的表达规律进行了优化研究,分别比较了最佳诱导起始生长量、 所需乳糖的浓度、诱导持续时间、补加乳糖和氨苄青霉素及不同培养基等参数对重组产物表达的影响# 实验结 果表明,对于@’,/D 启动子控制的重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到很好的诱导表达效果,诱导产物的 表达量、可溶性及酶活与EB@+ 诱导产物基本接近# 本研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组大肠杆菌谷氨酰 胺合成酶工业化生产提供了一定的参考依据# [关键词]( 谷氨酰胺合成酶,原核表达,乳糖,EB@+ [中图分类号]F ’G( [文献标识码]C ( [文章编号]!%%!*$:!:(%%: )%*%%::*%H !#$%’() (* +%,(-.’)/)0 1230/-’)% 45)06%0/% ’) !#$%’#$’( #)*’ 7)83,%8 .5 9/,0(% !, !# $#%’%( ,!# )#%* ,+% ,-% (!# 9I,,3J3 IK )1K3 4D132D3 ,C26-1 LIM0/, N21O3M71.5 ,P-6- $ !%%% ,9612/ ) ( # 4D6II, IK )1K3 4D132D3 ,L/2Q12J LIM0/, N21O3M71.5 ,L/2Q12J !%%’ ,9612/ ) :.0$/,0 :)*+,-./0123 17 0/12,5 ?MIR-D3R S5 K3M032./.1I2 ,M/M3,5 S5 32T503 M3/D.1I2# +,-./0123 452* .63./73 J323 17 /0?,1K13R KMI0 =/D1,,-7 4-S.1,17 J2R D,I23R 12.I ?MIU/M5I.1D 3V?M3771I2 O3D.IM ?8@9# CK* .3M .63 .M/27KIM0/.1I2 IK .617 M3DI0S12/2. ?,/701R 12.I =) W !(8 ),)/D.I73 /2R EB@+

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