猪瘟基因工程疫苗探究概况.docVIP

猪瘟基因工程疫苗探究概况 　摘　要：猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种烈性传染病，对现代养猪业带来了极大的经济损失。目前，猪瘟的防控形势日益加剧，传统的猪瘟疫苗已不再适应需求，因此，猪瘟基因工程疫苗的研究越来越备受关注。本文就对猪瘟基因工程疫苗的研究、发展及其应用作了简要介绍。 关键词：猪瘟 基因工程 研究概况 猪瘟发病迅速，死亡率高，可以感染所有日龄的猪，给养殖场（户）带来了极大的经济损失。随着分子生物学技术的发展，特别是对4种结构蛋白[C、Erns(E0)、E1、E2]的研究越来越深入，揭示了其编码基因、氨基酸组成、免疫原性[1]等特征，为猪瘟基因工程疫苗的研究开启了先河。 1 猪瘟基因工程疫苗的研究 1.1 亚单位疫苗 　在猪瘟病毒的众多保护性抗原中，E2蛋白具有极好的抗原性，使免疫猪能抵抗致死量强毒的侵袭。由于E2蛋白的最佳表达系统为真核细胞，因此，利用真核细胞表达系统表达的E2蛋白为抗原，制备的亚单位疫苗，具有较好的保护力。DeSmit等[2]成功研制了E2蛋白基因工程亚单位疫苗，分组对猪进行1次或2次免疫，然后通过一系列攻毒试验后进行猪体解剖，表明仅仅在进行了2次免疫的猪的胎儿内没有病毒的存在。因此，猪瘟亚单位疫苗产生抗体效价还较低，保护力还远远不够，该疫苗在实际应用中还有很多问题急需探索和解决。 1.2 合成肽苗 　多肽疫苗是通过化学合成法人工合成病原微生物的保护性多肽，再加入佐剂制成的疫苗。多肽疫苗由于完全是合成的，不存在毒力回升或灭活不完全的问题，已成为一种新型的疫苗。Dong等[3]报道成功研制出猪瘟合成肽疫苗，该疫苗的保护性多肽为5段猪瘟石门株B/C区的693-777位氨基酸，并且进行了科学的致死剂量的攻毒试验，结果表明免疫猪无发病致死现象，抵御了强毒的攻击，该多肽疫苗能使免疫猪产生很高效价的抗体，具有很强的保护力。 1.3 活载体疫苗 　目前，应用最为广泛的基因重组疫苗的载体是痘苗病毒，该病毒对宿主的选择性较小，具有较小的毒力。由于痘苗病毒毒力较低，因此将猪瘟E2基因插入痘苗病毒载体，进行基因重组成功研制的疫苗，能使免疫的动物产生高滴度的抗体，具有很好的保护作用。Moormann等[4]于2000年利用基因重组技术将原来的低毒力E2基因替代为具有强毒力的E2基因，成功完成了新型的重组猪瘟病毒的研制。此重大创新为研究猪瘟病毒的基因结构、复制、重组和免疫应答开创了新的局面。在2000年Hahn等[5]通过试验研究，成功构建了猪瘟杂交病毒，并且通过一系列攻毒试验，表明该杂交病毒的毒性已大大降低，基本无致病性。 　虽然此疫苗具有诸多优点，但是在生产实践运用中仍然发现有很多不足之处。该疫苗是人为利用基因重组技术研制的，再加上病毒的发生和变异又极其复杂，因此该病毒在自然界中，很有可能发生突变，对人和动物的生命及健康带来不可估量的灭顶之灾。 1.4 亚单位标记疫苗 　亚单位标记疫苗是以基因工程表达的猪瘟病毒保护性抗原为疫苗，而以检测猪瘟病毒的另外的结构蛋白的血清学技术作为检测手段，以区分免疫抗体和感染抗体。因为针对猪瘟病毒E0的抗体的产生是来自于自然感染的猪，而不是来自于猪瘟病毒E2蛋白亚单位疫苗接种的猪，所以现在大量运用的检测方法的抗原是E0基因表达蛋白。Van Rijn等[6]在试验研究中成功完成了猪瘟亚单位标记疫苗的制备，而该疫苗是基于猪瘟病毒 E2区域的成功表达，并且用此疫苗接种猪，能使其产生高滴度的抗体，具有很高的保护作用。 1.5 基因缺失疫苗 　基因缺失苗是利用重组DNA技术去掉病毒致病基因组中的某一片段，使缺损病毒株难以自发地恢复成强毒株，但并不影响其增殖或复制，且保持其良好的免疫原性，从而制备成免疫原性好且十分安全的基因缺失苗。在2004年Mayer等[7]利用重组DNA技术，去掉CSFV Alfoa/187(中等毒力株)和Eystrup株(强毒株)基因组中致病性很强的片段，研制成功了毒力较小的能诱导机体产生中和抗体的Npfo基因缺失病毒。试验研究中用这种新构建的毒株免疫接种猪，并用致死剂量的强毒株攻毒，结果免疫猪无发病致死现象，表明Npfo基因缺失病毒具有良好的免疫原性，可运用于安全性高的基因缺失疫苗的制备。 2 展望 　与传统疫苗相比，基因工程疫苗具有其特有的优点：把保护性抗原基因插入载体的能力,修饰的载体能表达来自病原微生物的保护性抗原基因,细菌和病毒载体都能产生兼有活疫苗和灭活苗优点的疫苗。这种类型的疫苗具有亚单位苗的安全性又具有活疫苗的效力，易于大规模使用(喷雾或气雾)，生产费用相对较低，某些基因工程疫苗不含有核酸等遗传物质，大大降低了核酸污染的可能性[8]。因此，现阶段对基因工程疫苗的研究显得越来越迫切。 　参考文献： 　[1] 徐志文，郭万柱，石谦。猪瘟病