BATF、RORγt和IL-17在哮喘小鼠脾组织中的表达和其意义.pdfVIP

目 录 1 BATF 、ROR γt 及 IL-17 在哮喘小鼠脾组织中的表达及其意 义 …………… ………………………………………… 1 1 . 1 中文摘要………………………………………………………1 1 . 2 英文摘要………………………………………………………4 1 . 3 前言……………………………………………………………9 1 . 4 材料与方法……………………………………………………14 1 . 5 结果……………………………………………………………22 1 . 6 讨论……………………………………………………………29 1 . 7 结论……………………………………………………………34 1 . 8 参考文献………………………………………………………35 1 . 9 英汉缩略词对照表……………………………………………40 2 致谢……………………………………………………………41 3 Th17 细胞与激素抵抗型哮喘（综述）………………………42 BATF 、ROR γt 及IL-17 在哮喘小鼠脾组织中的 表达及其意义 摘 要 目的：观察 B 细胞活化转录因子（ B-cell activiting transcription factor,BATF ）、维甲酸相关孤核受体（retinoic acid-related orphan recepptor γt，ROR γt）、白细胞介素-17 （interleukin-17，IL-17）在哮喘小鼠脾脏组织中的表达，探讨 BATF 在哮喘发病机制中的作用，为哮喘治疗寻找新途径。方法：取健康雌 性 BALB/c 小鼠 15 只，随机分为正常对照 （NS）组、哮喘（AS）组、 地塞米松（DXM）组，每组小鼠均为 5 只。AS 组、DXM 组小鼠分别于 第 0、7、14 天用卵清蛋白(OVA) 100μg 与氢氧化铝（Al （OH））1mg 3 混合的生理盐水混悬液 0.2ml 腹腔内注射致敏，NS 组则用等量生理 盐水代替行腹腔注射；第 21 天开始 NS 组予以生理盐水，AS 组及 DXM 组予 1%的 OVA 生理盐水溶液行超声雾化吸入，每天 1 次，每次 40 分 钟，连续 5 天进行激发；DXM 组于每次激发前 30 分钟，予地塞米松 磷酸钠注射液 1.0mg/kg 腹腔注射， NS 组及 AS 组则予以等量的生理 盐水腹腔注射，时间同上。 所有小鼠都于末次激发 24 小时后处死。 收集支气管肺泡灌洗液（BALF）行白细胞计数及分类计数；肺组织病 理切片 HE 染色来评估小鼠气道及肺组织炎性细胞浸润情况；酶联免 疫吸附法 (ELISA)检测脾脏组织匀浆 IL-17 的浓度；real-time PCR 法检测脾脏组织中 BATF mRNA、ROR γt mRNA 的表达水平。结果：（1） 肺组织病理学 HE 染色：AS 组可见小气道及小血管周围大量的炎性细 1 胞浸润，粘膜及粘膜下层水肿，肺泡腔内可见嗜酸性粒细胞、中性粒 细胞、单核细胞及溢出的红细胞；DXM 组炎细胞、渗出物较 AS 组少， 支气管上皮基本完整，可见明显的炎症吸收；NS 组小气道粘膜无明 显水肿，管腔光滑、无闭塞，周围小血管基本未见炎性细胞的浸润。 （2）与 NS 组比较，AS 组、DXM 组小鼠 BALF 中白细胞总数、中性粒 细胞数和嗜酸性粒细胞数明显增多 (P＜0.05),与 AS 组比较，DXM 组 BALF 中白细胞总数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数有明显降低(P ＜0．05)。 （3）脾脏组织匀浆 IL-17 的浓度：AS 组 IL-17 浓度最高， DXM 组其次，NS 组最低，三组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）， 且与 NS 组比较，AS 组及 DXM 组 IL-17 浓度均明显增高，差异有统计 学意义 （P＜0.05），DXM 组较 AS 组 IL-17 浓度降低，差异有统计学 意义 （P＜0.05）。（4）脾脏组织中 BATF mRNA、ROR γt mRNA 表达水