DNA甲基化对人单核细胞FcεRIγ亚基基因表达的调节和其在特应性皮炎发病中的作用.pdfVIP

硕{j7≯何论文 }，文摘要 摘要 特应性皮炎是一种遗传、免疫和环境等因素卡日兀作刖的炎症性皮 肤病，其确切的发病机制尚未完全明r，现有研究证实树突状细胞和 单核细胞表面IgE高亲和力受体(FceRI)异常表达与特应性皮炎发 键作用。研究发现FceRIy亚基基因转录启动子中存在两处Alu重复 序列，而Alu序列是DNA甲基化的高发区，那么DNA甲基化是否 FceRIy亚基基因的调控是否参与特应性皮炎的发病?本课题以DNA 甲基化对FceRIy亚基基因转录表达的调控作用为着眼点，研究树突 状细胞的前提细胞即单核细胞通过DNA甲基化转移酶抑制剂处理后 亚基基因表达及DNA甲基化状态的差异；从而探讨病理性DNA低 甲基化对人单核细胞FceRI),亚基表达的调控在特应性皮炎发病中的 作用。 第一部分 研究 对正常单核细胞FceRIy亚基基因表达的影响，从而探讨DNA甲基化 对单核细胞FceRI),亚基基因表达的调控。 方法密度梯度离心分离3名健康志愿者的外周血单个核细胞， 磁珠分选单核细胞，脂多糖(LPS)刺激培养，分别用或小用DNA 硕卜≯何论文 中文摘要 细胞检测，提取全基因组DNA、mRNA及蛋白：然后用亚硫酸盐氢 钠基因组测序法检测药物处理与未处理单核细胞FceRIy亚基启动子 聚合酶链反应(real．time mRNA的表达水平。 甲基化水平明显降低(P=O．003)； 响单核细胞FceRI表面的表达。 关键词5-azaC，FceRI，FceRIy，甲基化，单核细胞 第二部分特应性皮炎患者单核细胞FceRI),亚基表达及调 控序列甲基化状态的研究 目的研究AD患者外周血单核细胞是否存在FceRIy亚基及 FceRI表达异常，并是否受DNA甲基化调控。 0例正常人的外周血 方法密度梯度离心分离10例AD患者和1 单个核细胞，磁珠分选单核细胞，用流式细胞仪检测FceRI蛋白在单 RT-PCR) 核细胞表面的表达水平；实时定量聚合酶链反应(real．time 的蛋白表达水平；亚硫酸氢钠测序检测FceRIy亚基启动子DNA甲基 硕}：学何沦文 中文摘要 化调控序列的甲基化状念。 1,P=0．021)。 FceRI),亚基蛋白表达呈负相关性(R_一0．71 结论AD患者单核细胞FceRI),亚基基因调节序列甲基化水平低 下，导致FceRl7亚基与FceRI在细胞表面过度表达，从而参与疾病 的发病过程。 关键词特应性皮炎，甲基化，FceRI，FceRIy，单核细胞 ABSTRACT Environmentalfactors Background themanifestation influencing of diseases，which modificationof atopic implyepigenetic keygenesmay contributetothe of disease．The pathogenesisatopic high．affinity for