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FOXJ2 在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞迁移作用的研究 中文摘要 FOXJ2 在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞 迁移作用的研究 中文摘要 目 的： 脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤。包括神经外科手术、放射治疗及化 疗等多模式治疗相结合，但脑胶质瘤患者的预后仍然不令人满意。局部复发是治疗失 败的主要原因。胶质瘤细胞具有侵袭和迁移能力是导致局部复发的重要原因。FOXJ2 是转录因子叉头框（Forkhead box ，FOX ）蛋白家族成员之一，FOXJ2 涉及细胞周期 的调控以及肿瘤的发生发展。已有研究表明 FOXJ2 表达的上调可抑制乳腺癌的迁移 和侵袭能力。本研究旨在初步了解 FOXJ2 在脑胶质瘤中的表达情况及其与胶质瘤患 者临床病例因素的关系，检测胶质瘤细胞中 FOXJ2 、E-钙黏蛋白（E-cadherin ）的表 达，分析其相互的关系以及对胶质瘤细胞迁移的影响，探讨 FOXJ2 的异常表达在胶 质瘤发生、发展过程中的意义。 方 法： 1. 从组织学水平，本研究首先通过 Western Blot 方法，检测在两组人正常脑组 织和七组不同级别胶质瘤组织中 FOXJ2 的表达情况；然后，运用免疫组化方法检测 80 例胶质瘤组织标本中 FOXJ2 和 E-cadherin 的表达情况，并采用统计学方法分析 FOXJ2 、E-cadherin 的表达情况与胶质瘤患者的年龄、性别、肿瘤位置、大小及肿瘤 组织学分级等临床病理因素之间的相关性。通过 Kaplan-Meier 法分析 FOXJ2 的表达 与胶质瘤患者的生存率之间的相关性； 2. 从细胞分子水平，本研究选取 U87MG ，U373 ，H4 ，A172 和 U251MG 等五 种胶质瘤细胞株，用 Western Blot 技术检测 FOXJ2 、E-cadherin 和波形蛋白（Vimentin ） 的表达。选取U87 胶质瘤细胞株，瞬时转染 FOXJ2 过表达和干扰质粒，通过 Western I 中文摘要 FOXJ2 在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞迁移作用的研究 Blot 和细胞免疫荧光检测胶质瘤细胞 E-cadherin 和 Vimentin 的表达；用划痕实验和 Transwell 迁移实验检测细胞迁移能力。明确 FOXJ2 对胶质瘤的迁移的影响。 结 果： 1. Western Blot 及免疫组化结果均显示，FOXJ2 在胶质瘤组织中的表达随胶质 瘤病理级别的增高而降低，提示 FOXJ2 的表达强度与胶质瘤组织学分级（P= 0.012 ） 之间的关系有统计学意义，而与患者的年龄、性别、肿瘤体积大小、位置、是否发生 坏死等临床病理特征间无差异。Kaplan-Meier 生存曲线分析显示 FOXJ2 在胶质瘤中 的低表达患者的总生存率明显低于FOXJ2 高表达的患者（P0.01 ）。 2. Western Blot 技术检测 U87 ，U373 ， H4 ，A172 ，U251 胶质瘤细胞株 FOXJ2 的表达，结果显示 FOXJ2 在迁移能力弱的 H4 细胞中表达较高，而在迁移能力强的 U251 细胞中表达偏低。选取 U87 和 U251 细胞株，检测上皮间质转化 （epithelial-mesenchymal transition，EMT ）标记，观察到FOXJ2 与 E-cadherin 表达呈 正相关（r= 0.303 ；P 0.01 ），Vimentin 的表达情况与FOXJ2 的表达情况相反。 3. 通过对转染过表达 FOXJ2 质粒的 U87 胶质瘤细胞，进行 Western Blot 和细胞 免疫荧光检测，观察到 FOXJ2 过表达可促进胶质瘤细胞 E-cadherin 的表达，抑制 Vimentin 的表达。划痕实验和Transwell 迁移实验，观察到 FOXJ2 过表达可抑制胶质 瘤细胞的迁移。 4. 通过对转染 shRNA FOXJ2 质粒的 U87 胶质瘤细胞，进行 Western