FIZZ1和NOTCH1在哮喘大鼠肺组织中的表达和罗格列酮的干预作用.pdfVIP

摘要 FI ZZl及NOTCHl在哮喘大鼠肺组织中的表达及罗格 列酮的干预作用 硕士研究生：冯晓霞 导 师：栾 斌 专 业：儿科学 郑州大学第三临床学院 河南 郑州450052 摘 要 气道重塑是支气管哮喘的重要病理特征之一，在哮喘发病过程中起重要的 作用。气道重塑过程中平滑肌细胞增生、肥大，成纤维细胞活化，并且分化为 musclea-actin，a—SMA)的肌纤维细胞，a 特异性表达a．平滑肌动蛋白(smooth ．SMA目自i『被认为是早期气道重塑中重要的指标。肺间质纤维化的过程中，发生 了气道炎症与肺纤维化的病理改变，这与哮喘发生过程中的气道炎症和气道重 塑过程中纤维化为相似的病理改变，据此可以推断：在肺间质纤维化发病过程 中的发挥重要作用的某些炎症因子，在哮喘的发病过程中可能同样发挥重要作 zone 用。发现于炎症区分子l(foundin 1，FIZZl)又名类抵抗素因 inflammatory 子(Resistin．1ike 立新基斟¨。NOTCHl是一种单次跨膜受体蛋白，可影响多种细胞的分化、增 殖和凋亡【21。近期研究显示在肺成纤维化过程中二者均可促进肌纤维细胞的分 化，而且两者的作用机制存在密切的联系。但二者在支气管哮喘的发生中是否 发挥作用，作用机制及相关性还了解甚少。有研究表明噻哗烷二酮(TZD)类药物 如罗格列酮可抑抵抗素的表达13】。本实验中通过建立哮喘模型，研究FIZZl及 NOTCHl在哮喘大鼠肺内的表达以及在气道重塑发生过程中的作用，并应用罗 格列酮进行干预，以期为哮喘的早期干预以及治疗提供理论依据。 摘 要 目 的 本实验中通过检测支气管哮喘模型大鼠肺组织中a-SMA蛋白及FIZZl基因， 用，以及罗格列酮对气道重塑的干预作用，旨在为阐明支气管哮喘复杂的发病 机制及治疗寻找一种新的研究方向。 材料和方法 1动物分组及模型制作方法 雄性SDF级大鼠45只随机分为哮喘组、干预组及对照组，每组15只。哮 敏，用2％OVA雾化吸入激发。干预组致敏和激发同哮喘组，于雾化第七天丌始 给予罗格列酮灌胃共七天。对照组用生理盐水双侧腹股沟、腹腔注射及雾化吸 入，剂量及时间同哮喘组。 2标本留取 各组大鼠于末次雾化结束后24小时内麻醉后丌胸取左肺，置于负800冰箱 中冻存，以备作逆转录．多聚酶链反应用。然后迅速经右心室插管至肺动脉，注 入生理盐水冲洗大鼠肺组织，至肺组织变白后摘取右肺中叶，并将肺组织放置 固定于4％的甲醛溶液，石蜡包埋，切片，分别做HE染色和免疫组织化学染色。 3免疫组化及HE染色结果分析 对于HE染色图片，观察各组病理改变。对于免疫组化图片结果，测定阳性 区平均光密度值。 4 提取冻存的大鼠左肺的总RNA，并逆转录为cDNA，设计引物扩增目的片 NOTCHl与GAPDH的灰度值。 5统计学分析 II 摘要 4-s)表 应用SPSSl7．0对数据进行统计学分析。计量资料用均数4-标准差(i 示。采用单因素方差分析对各组样本均数进行比较，各因素之间的相关性采用 pearson相关分析，以a=0．05为检验水准。 结果 lHE染色结果 哮喘组大鼠气道出现