甲苯胺蓝法测定肝素钠含量的校准曲线研究-东华大学化学化工与生物.pdfVIP

第26 卷, 第2 期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 6 , No . 2 2 0 0 9 年 3 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y L aboratory March , 2 0 0 9 甲苯胺蓝法测定肝素钠含量的校准曲线研究 a a a 柳轶男 　莫秀梅　何创龙　王红声 ( 东华大学材料科学与工程学院　上海市松江区人民北路2999 号　201620) a( 东华大学化学化工与生物工程学院　上海市　201620) 　甲苯胺蓝法是一种被广泛使用的测肝素钠含量的方法。本文绘制了此方法的校准曲线, 并且 确定了肝素钠线性范围。肝素钠浓度超过了34g/ mL, 甲苯胺蓝法将不再敏感。 肝素钠, 甲苯胺蓝法, 校准曲线。 : 657. 32: : 1004-8138(2009) 02-0278-03 O B 1　前言 肝素钠是一种硫酸化的、带高负电荷的酸性粘多糖混合物, 常用来做抗凝血剂。在肝素钠释放 体系中, 肝素钠在较短的时期内被缓慢释放, 同时, 在很高程度上保持了肝素钠的生物活性。因此, [ 1] 与共价涂层相比, 肝素钠释放体系更适合短期临床应用 。 [ 2—4] [ 5] 目前, 肝素钠的测定方法有分光光度法 、荧光法 、共振瑞利散射( RRS) 、高效毛细管电泳 [ 6] 法 。但是, 高效毛细管电泳法只能应用于检测临床肝素钠在血液中的含量, 并且由于不同生物个 体的影响, 此方法受到了一定限制。荧光方法对实验要求较高, 不但要尽量避光操作, 测量时间尽可 [ 7] 能的短, 而且成本很高。蔡炼等 基于肝素钠对甲基紫( MV) 共振瑞利散射的增强作用, 检出限为 0. 041 / , 只能适用于痕量肝素钠的测定。 mg L [ 8] 甲苯胺蓝(Tol idine b le) 染色法测肝素钠含量的方法最初是由Macintosh, F. C 和Smith P. K. [ 9] 提出, 之后由于其操作简便、稳定、选择性好而被广泛应用。但是, 由于分光光度法都是有适用 [ 10] 范围的, 只有在适当的浓度内, 吸光度才与浓度呈线性关系, 即符合郎伯-比耳定律。Peng 等 通过 伏安法测得肝素钠极限浓度为0. 44 / , 但没有给出校准曲线。本文通过改变肝素钠含量重复 g mL 甲苯胺蓝染色法, 得到校准曲线和测肝素钠的极值为34g/ mL 。这表明, 如果肝素钠含量超过这个 值时, 必须通过稀释, 降低肝素钠溶液浓度才可应用甲苯胺蓝染色法。 2　实验部分 2. 1 3 酶标仪( 美国 公司) ; -600 型电热恒温水箱( 上海一恒科技 MU LT ISKAN M K Thermo DKB B 有限公司) ; TU-1901 双光束紫外可见分光光度计( 北京普析通用仪器有限公司) 。甲苯胺蓝溶液 国家自然科学基金资助项目(