苯妥英钠和奥拉西坦对昆明小鼠海马、小脑神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………．1 英文摘要………………………………………………………………………．5 研究论文苯妥英钠和奥拉西坦对昆明小鼠海马、小脑神经细胞凋亡及 Bcl．2、Bax表达的影响 前言……………………………………………………………………………………………。。1C0月U吾……………………………………………………………………………………………。。l 材料与方法………………………………………………………………10 二日木……………………………………………………………………………………………·．1U结果……………………………………………………………………………………………．．16 附图………………………………………………………………………20 附表……………………………………………………………………………．43 讨{念……………………………………………………………………………………………。．45 结论……………………………………………………………………………………………．．51 1 参考文献…………………………………………………………………5 综述促智药奥拉西坦的基础和临床研究…………………………………56 致谢…………………………………………………………………………………………………～70 个人简历………………………………………………………………………71 中文摘要 苯妥英钠和奥拉西坦对昆明小鼠海马、小脑神经细胞凋亡及 Be I-2、Bax表达的影响 摘 要 目的：苯妥英钠(Phenytoinsodium，PHT)在临床用于治疗癫痫、心律 失常、三叉神经痛等疾病，其中以抗癫痫应用最为常见。但其用药剂量和 中毒剂量非常接近，且体内药代动力学模型呈非线性动力学性质，易出现 多个系统的毒副作用。神经系统的不良反应主要为小脑萎缩、小脑功能失 广泛应用的促智药物之～，可影响胆碱能、谷氨酸能等多个神经递质系统 及提高大脑对氧的利用能力，促进大脑联络纤维突触的可塑性，调动未受 损脑组织重组及功能重建，具有激活、保护和修复脑细胞的作用。在临床 上用于治疗各种理化因素引起的脑损伤，脑缺氧和慢性脑功能不全等。本 实验通过免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl．2、Bax的表达水平和原 位脱氧核糖核苷酸末端标记法(TUNEL)，观察苯妥英钠和奥拉西坦对小鼠 海马、小脑神经细胞凋亡的影响，探讨苯妥英钠引起神经系统不良反应机 制，奥拉西坦对苯妥英钠作用后神经细胞是否有保护作用及其剂量与效果 之间的关系。 方法： 1实验动物及分组：4周龄健康雄性昆明小鼠40只，体重22士29，随 只)。 以上均为灌胃给药，每天1次。 3标本的制作及检测：用10％水合氯醛麻醉小鼠，仰卧固定，剪开胸 腔，从心尖处插入圆头针，先灌流O．9％生理盐水冲洗，再灌注4％多聚甲 醛磷酸缓冲液，同时从右心耳处剪开心脏放血。灌注完毕后立即断头，迅 速取出大脑和小脑，放入4％多聚甲醛固定，常规梯度乙醇脱水，二甲苯 中文摘要 透明，浸腊，包埋，选取小脑和海马连续冠状切片，片厚5岬。HE染色 观察组织形态学改变，TUNEL法检测神经细胞凋亡情况，免疫组织化学 法分析Bcl．2蛋白和Bax蛋白的表达。 4统计学处理：应用SPSS13．0统计软件进行数据分析。多组间均数 ANOVA，组间均数比较应用SNK检 显著性检验应用方差分析One．Way 验，当P0．05时认为差异具有统计学意义。 结果： 1 HE染色结果 NS组海马和小脑神经细胞均排列整齐，细胞结构清晰完整，胞浆红 见大量凋亡细胞，细胞排列紊乱，胞核固缩深染及周围空泡形成。 PHT+ORC3组海马和小脑神经细胞均排列基本整齐，细胞凋亡程度较轻。 PHT+0I