PEDPEA-15在食管癌中表达的生物学意义和其基因沉默在TE1细胞凋亡中的作用研究.pdfVIP

中文摘要 PED／PEA,．15在人食管癌中表达的生物学意义及其 基因沉默在TEl细胞凋亡中的作用研究 摘 要 carcinoma)是世界上常见的恶性肿瘤之一， 目的：食管癌(esophageal 在各种癌症死亡率中居第6位；每年新增患者超过30万人，并且大多发 生于发展中国家。我国是世界食管癌高发地，尤其以河北磁县、涉县、河 南林县、太行山区、苏北地区、大别山区、JlI北地区、潮汕地区以及新疆 自治区哈萨克族聚居地为高发。食管癌居我国消化道恶性肿瘤发病率和死 亡率的第二位，其病理类型以鳞状细胞癌为主，占发病率的90％左右。 凋亡抑制蛋白(inhibitor ofapoptosis enrichedin enrichedin diabetes／phosphoprotein 抗凋亡功能的小分子蛋白质，1998年在2型糖尿病患者的组织中克隆出 来，研究发现其与信号转导、凋亡、ERK的激活和葡萄糖转运等多种细 胞进程有关。因其特殊的分子结构及抑制细胞凋亡的功能，并可能作为靶 蛋白为肿瘤的诊断及治疗开辟新途径而日益引起人们的关注。 Caspase．3介导的凋亡在生物体细胞中普遍存在，在多种刺激因素的作用 下，启动信号可以激活Caspase．3，使胞质、胞核及细胞骨架的重要蛋白 质降解失活，因此科学界认为Caspase．3是哺乳动物细胞凋亡中的关键酶。 kinase C，蛋白激酶C)途径中PEA．．1 lq21．22，是PKC(Protein enrichedinastmcyt：es，星型胶质细胞浓缩磷蛋白酶)的 (phosphoprotein 底物。PED／PEA．15以两种分化的剪接体存在于细胞中，大小分别为2．8 够阻断Caspase的作用，从而使肿瘤细胞逃避细胞凋亡。研究表明， PED／PEA．．15在多种肿瘤细胞中高表达，包括肺鳞癌、喉癌、前列腺癌等。 其表达水平与肿瘤的性质、分化程度、预后、肿瘤的演进过程及放化疗有 关。 中文摘要 5蛋白在人食管癌组织中的表达情况，分析 本实验检测了PED／PEA．1 了其与食管癌临床病理特征的关系，结合随访资料探讨了其表达的意义及 建立PED／PEA．15质粒转移细胞系及PED／PEA．15基因沉默细胞系。观察 其对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响，并检测Caspase．3在不同细胞系 霉素)作为干扰剂，诱导凋亡。以期揭示PED／PEA．15抑制食管癌细胞凋 亡、调控细胞周期的可能分子机制。通过构建癌裸鼠移植瘤模型，观察 PED／PEA．15对荷瘤裸鼠肿瘤生长的促进作用，研究其作为食管癌基因治 疗靶点的可能性，为PED／PEA．15抑制剂应用于肿瘤的临床治疗提供理论 基础及实验依据。 方法： 1食管癌组织中PED／PEA．15蛋白的表达及其意义’ 收集河北医科大学第四医院胸外科2005年手术的食管鳞状细胞癌住 院患者的病理组织腊块85例。男性患者54例，女性患者3l例，男女比 为1．74／1，病人平均年龄为57．1岁。食管胸上段癌11例，中段癌51例， 下段癌23例。术前术后未行放化疗，术后随访资料完整，连续随访5年 性病组织90例。免疫组织化学方法联合检测85例食管癌组织及90例正 常食管组织中PED／PEA．15蛋白的表达，分析其与食管癌临床病理特征的 关系，并结合随访资料探讨它们在食管癌中表达的意义及预后价值。结合 Yes6中PED／PEA．15的表达。 2PED／PEA．15基因沉默对食管癌细胞凋亡的影响 选取体外培养的人食管癌细胞株为研究对象，利用RT-PCR法扩增出 染至食管癌细胞株中，观察PED／PEA．15的表达对食管癌细胞凋亡的影 响；通过转染PED／PEA．1 对凋亡的影响并分析可能的原因，探讨其可能的作用机制。采用ADR(N 中文摘要 霉