Pirh2、p53在不同转移潜能乳腺癌细胞系中的表达和意义.pdfVIP

摘 要 Pirh2是最近发现的泛素连接酶E3家族的新成员，具有内在“泛 素化”活性的RING—H2结构域；p53是迄今发现与人类恶性肿瘤相关 性最高的一种抑癌基因。已有研究表明，Pirh2能够促进p53泛素化， 导致其降解，从而参与癌症进展。而癌症的发展、转移过程与癌细胞 的侵袭转移能力密切相关。 【目的】 本实验旨在探讨Pirh2、p53在不同转移潜能乳腺癌细胞系中的 表达及意义，并以正常乳腺上皮细胞系作为对照，以期证明Pith2、 p53与乳腺癌细胞侵袭转移能力的相关性，为乳腺癌的诊治过程寻找 新的分子机制及治疗靶点提供初步理论依据。 【方法】 传代培养正常乳腺上皮细胞系MCF—IOA、低转移潜能乳腺癌细胞 1、高转移潜能乳腺癌 系MCF-7、中转移潜能乳腺癌细胞系MDA—MB一23 印迹法(Western mRNA及蛋白在正 blot)方法分别检测Pith2、p53 常乳腺上皮细胞系及不同转移潜能的乳腺癌细胞系中的表达情况。 【结果】 腺癌细胞系MCF一7、中转移潜能乳腺癌细胞系MDA—MB一231、高转移潜 万方数据 能乳腺癌细胞系MDA-MB-435s中均有表达。 2．Pirh2在乳腺癌细胞系中的表达高于正常乳腺上皮细胞系，差 异有统计学意义(／KO．05)，p53在乳腺癌细胞系中的表达低于正常乳 腺上皮细胞系，差异有统计学意义(尺0．05)。 3．随着乳腺癌细胞转移潜能的升高，Pirh2的表达水平呈上升趋 势，组问两两比较，差异有统计学意义(P(O．05)；p53的表达水平 呈下降趋势，组间两两比较，差异有统计学意义(KO．05)。 只RⅥO．01；r蛋自=一0．953，P蛋自O．01)。 【结论】 乳腺癌细胞系中高表达，p53在乳腺癌细胞系中低表达，并且随着乳 腺癌细胞转移潜能的增高，Pirh2表达水平上调、p53表达水平下降。 2．Pith2、p53的表达变化水平呈显著负相关，提示在乳腺癌细 胞中可能存在Pirh2／p53信号通路，并且Pirh2负性调控p53。 【关键词】乳腺癌细胞系；Pirh2、p53；实时荧光定量PCR、蛋白质 免疫印迹法 万方数据 ABSTRACT Pirh2isthenewmemberofE3ubiquitinligasefamily，has RING—H2structure isfound domain；p53 intrinsic“Ubiquitylation”active the correlationwithhuman tumor that highest malignantsuppressor researchshowsthatPirh2can tothe 3，lead genes．Existing ubiquitylatep5 of involvedincancer 3，which p5 degradation